Anticuerpo policlonal de conejo Anti-KEAP1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q14145

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de KEAP1

• KEAP1 (proteína 1 asociada a ECH tipo Kelch), también conocida como INrf2 o KLHL19, funciona como adaptador específico de sustrato para el complejo de ubiquitina ligasa E3 BCR (BTB-CUL3-RBX1). Referencias relacionadas: PMID:14585973 PMID:15379550 PMID:15572695
• Actúa como un sensor redox crítico al dirigir el factor de transcripción NFE2L2/NRF2 a la ubiquitinación y degradación proteasomal en condiciones basales, manteniendo así niveles bajos de expresión de genes citoprotectores. Referencias relacionadas: PMID:15601839 PMID:16006525
• Ante estrés oxidativo o electrofílico, los residuos de cisteína reactivos en KEAP1 se modifican covalentemente, inactivando el complejo de ligasa y permitiendo que NRF2 se acumule en el núcleo e induzca la expresión de enzimas desintoxicantes de fase II. Referencias relacionadas: PMID:16006525 PMID:17127771 PMID:18251510
• Vías de autofagia selectiva que involucran a SQSTM1/p62 pueden secuestrar a KEAP1, lo que conduce a la activación de NRF2; el complejo BCR(KEAP1) también ubiquitina a SQSTM1/p62, potenciando su propia degradación. Referencias relacionadas: PMID:20452972 PMID:28380357
• Otros sustratos del complejo BCR(KEAP1) incluyen BPTF y PGAM5, lo que amplía su papel en la regulación celular. Referencias relacionadas: PMID:15379550 PMID:17046835
• KEAP1 se localiza predominantemente en el citoplasma, pero también puede encontrarse en el núcleo, lo que coincide con sus funciones regulatorias.
• Se expresa de forma amplia en tejidos humanos, observándose los niveles más altos en el músculo esquelético.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen S-nitrosilación y ubiquitinación, y contiene dominios de repetición Kelch críticos para el reconocimiento de sustratos.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blotting, el peso molecular predicho de KEAP1 es de aproximadamente 70 kDa; utilice controles positivos adecuados de lisados de humano, ratón o rata para confirmar la especificidad.
• En inmunofluorescencia/ICC, considere optimizar las condiciones de fijación y permeabilización para detectar tanto la fracción citoplasmática como nuclear de KEAP1.
• Para aplicaciones de ELISA sándwich, se recomienda combinarlo con un anticuerpo de captura validado; valide el par de anticuerpos en la matriz de muestra correspondiente.
• Como anticuerpo policlonal, la consistencia entre lotes puede variar; es recomendable probar nuevos lotes en un experimento piloto antes de realizar estudios a gran escala.

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