Anticuerpo policlonal de conejo Anti-KEAP1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14145

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de KEAP1

• KEAP1 (proteína 1 asociada a ECH similar a Kelch), también denominada INrf2 o KLHL19, es una proteína de 70 kDa citoplásmica y nuclear que funciona como adaptador específico de sustrato para el complejo de ubiquitina ligasa E3 BCR (BTB-CUL3-RBX1).
• En condiciones basales, KEAP1 dirige al factor de transcripción NFE2L2/NRF2 para su ubiquitinación y degradación por proteasoma, reprimiendo así la expresión de genes citoprotectores. Referencias relacionadas: PMID:14585973 PMID:15379550 PMID:15572695 PMID:15601839 PMID:16006525
• Como sensor clave del estrés oxidativo, KEAP1 contiene residuos de cisteína altamente reactivos que sufren modificaciones covalentes no enzimáticas por parte de electrófilos, lo que provoca la inactivación del complejo ligasa y la acumulación nuclear posterior de NRF2. Referencias relacionadas: PMID:16006525 PMID:17127771 PMID:18251510
• KEAP1 también participa en la autofagia selectiva al interactuar con SQSTM1/p62; esto secuestra a KEAP1 en cuerpos de inclusión, activando aún más a NRF2, al mismo tiempo que media la ubiquitinación y degradación de SQSTM1/p62. Referencias relacionadas: PMID:20452972 PMID:28380357
• Otros sustratos del complejo de ubiquitina ligasa que contiene KEAP1 son BPTF y PGAM5, lo que pone de manifiesto sus amplias funciones regulatorias. Referencias relacionadas: PMID:15379550 PMID:17046835
• KEAP1 se expresa de forma generalizada en los tejidos humanos, con los niveles más altos encontrados en el músculo esquelético; la proteína contiene repeticiones características de Kelch y un dominio BTB, y está sujeta a modificaciones postraduccionales que incluyen la S-nitrosilación y la ubiquitinación.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno comprende los aminoácidos 320–510 de la KEAP1 humana; esta región puede permitir el reconocimiento de la KEAP1 de longitud completa y potencialmente de epítopos conservados entre especies. Verifique la especificidad en su sistema de muestras.
• Para Western blotting, se espera una banda correspondiente al peso molecular predicho de aproximadamente 70 kDa. Incluya controles positivos y negativos adecuados.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), KEAP1 se puede detectar tanto en el compartimento citoplásmico como nuclear. Considere optimizar los pasos de fijación y permeabilización.
• La reactividad cruzada reportada incluye humano, ratón y rata; sin embargo, el rendimiento en cada especie debe validarse con tejidos o líneas celulares relevantes.
• Para ELISA, el inmunógeno de proteína recombinante sugiere un uso potencial en configuraciones de captura o detección; confirme la afinidad de unión y la especificidad con la proteína diana y las proteínas de control.

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