Anticuerpo Policlonal Anti-Ki67 para WB, IHC-P, ELISA - P46013

Especificaciones y Parámetros Centrales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Ki67

• Ki67, codificado por el gen MKI67, es una proteína marcadora de proliferación bien establecida (también conocida como Antígeno KI-67 o Antígeno Ki67).
• Durante la mitosis temprana, Ki67 se recolocaliza desde los nucleolos hasta la superficie de los cromosomas, formando estructuras extendidas en forma de pincel. Estos pinceles altamente cargados actúan como un surfactante, evitando la agregación cromosómica mediante repulsión estérica y electrostática. Referencias relacionadas: PMID:27362226
• En anafase, Ki67 cambia a un atrayente cromosómico, experimentando desfosforilación y separación de fases líquido-líquido dependiente de ARN para promover la agrupación cromosómica. Referencias relacionadas: PMID:32879492, PMID:39153474, PMID:28935370
• Ki67 se une al ADN con preferencia por secuencias superenrolladas y ricas en AT, y también interactúa con ARN ribosómicos prematuros durante la anafase. Referencias relacionadas: PMID:10878551, PMID:28935370
• También puede contribuir a la organización de la cromatina, aunque el mecanismo directo aún no está claro. Referencias relacionadas: PMID:24867636
• Ki67 se localiza en el nucleolo durante la interfase y en la superficie de los cromosomas durante la mitosis.
• La proteína está sujeta a diversas modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación, acetilación, formación de enlaces isopéptidos y conjugación con ubiquitina.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno recombinante cubre los aminoácidos 460-680 de Ki67 humano (NP_002408.3), lo que puede influir en la especificidad del epitopo. Tenga esto en cuenta al diseñar los ensayos de detección.
• Para western blot, tenga en cuenta el alto peso molecular (~359 kDa); utilice geles de SDS-PAGE de bajo porcentaje y tiempos de transferencia prolongados o métodos de transferencia húmeda para garantizar una transferencia eficiente.
• Para IHC-P, valide las condiciones de recuperación de antígeno y la dilución del anticuerpo primario en el sistema de muestra correspondiente. Incluya controles positivos (por ejemplo, tejidos en proliferación) y negativos adecuados.
• Este anticuerpo presenta reactividad cruzada con ratón, lo que permite su uso en estudios de xenoinjertos o modelos murinos; sin embargo, verifique experimentalmente el rendimiento específico por especie.
• Las aplicaciones de ELISA requieren la optimización de los protocolos de recubrimiento y detección.

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