Anticuerpo Monoclonal Anti-KIR2DL2/KIR2DL3 para WB, IF/ICC, FC, ELISA - P43628

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de KIR2DL2/KIR2DL3

• KIR2DL3 (Receptor tipo inmunoglobulina de célula asesina 2DL3, también conocido como CD158b, receptor p58 NK, NKAT2) es un miembro glucoproteico de transmembrana de tipo I de la familia KIR. Funciona como un receptor inhibidor en células asesinas naturales (NK) para allotipos específicos de HLA-C, incluyendo HLA-Cw1, Cw3 y Cw7.
• El receptor contiene dos dominios extracelulares tipo inmunoglobulina C2, una hélice de transmembrana única y una cola citoplasmática con motivos inhibidores basados en tirosina de receptores inmunes (ITIMs) que reclutan fosfatasas para bloquear señales de activación.
• La expresión de KIR2DL3 está restringida en gran medida a las células NK, donde media la autotolerancia y patrulla la ausencia de "yo" (missing-self) mediante el monitoreo de la expresión de MHC de clase I en las células objetivo.
• La interacción de KIR2DL3 con su ligando suprime la citotoxicidad mediada por células NK, evitando la lisis de células sanas mientras permite la muerte de células que han regulado a la baja el HLA-C.
• El dominio extracelular experimenta glicosilación N‑ligada y formación de enlaces disulfuro, contribuyendo a las múltiples formas de peso molecular observadas (~27 kDa no glicosilada y ~37–38 kDa glicosilada).
• KIR2DL2, codificado por un gen distinto, comparte aproximadamente un 96% de identidad de aminoácidos con KIR2DL3 y exhibe una especificidad HLA‑C similar; el inmunógeno del anticuerpo (aa 22‑245 de KIR2DL3) abarca una región conservada entre ambos receptores, permitiendo la detección cruzada.
• El splicing alternativo del transcrito de KIR2DL3 puede producir variantes con propiedades de unión al ligando o señalización alteradas, aunque la isoforma de longitud completa es la forma funcional predominante.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para Western blotting, espere bandas alrededor de 27 kDa (no glicosilada) y 37–38 kDa (forma glicosilada). Use condiciones reductoras y cargue lisados totales de líneas celulares NK positivas para KIR (p. ej., NK92, YTS) como controles positivos. Considere la desglicosilación con PNGase F para simplificar el patrón de bandas.
• Dado que el inmunógeno cubre el dominio extracelular, el anticuerpo reconoce el receptor de superficie nativo; para citometría de flujo e inmunofluorescencia, no se necesita permeabilización para la tinción de superficie. Titule el anticuerpo e incluya un control de isotipo para asegurar la especificidad en PBMCs humanos o células NK aisladas.
• Para aplicaciones de ELISA, este anticuerpo monoclonal puede servir como reactivo de captura o detección; si construye un inmunoensayo tipo sándwich, empareje con un agente de unión a un epítopo separado. Valide con proteína recombinante KIR2DL3 o lisados celulares.
• Confirme la reactividad cruzada con KIR2DL2 probando en líneas celulares que expresen cada receptor individualmente (p. ej., transfectantes 293T), dada la alta homología de secuencia.
• Debido al polimorfismo de KIR, los patrones de tinción pueden variar entre donantes; optimice la concentración de anticuerpo para cada aplicación y tipo celular.

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