Anticuerpo policlonal de conejo anti-KLKB1 para WB, IHC-P, ELISA - P03952

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de KLKB1

• KLKB1 codifica para el prekalicreína plasmático, el zimógeno de la calicreína plasmática, una serina proteasa que circula en la sangre como precursor inactivo.
• Tras la activación, la calicreína plasmática participa en la activación dependiente de superficie de la coagulación sanguínea al activar recíprocamente el factor de coagulación XII (FXII) después de unirse a superficies cargadas negativamente.
• Libera el péptido vasoactivo bradicinina a partir del cininógeno de alto peso molecular (HMWK, por sus siglas en inglés), vinculando el sistema de activación por contacto con la inflamación y la permeabilidad vascular.
• La calicreína plasmática también puede contribuir al sistema renina-angiotensina al convertir la prorenina en renina activa.
• La localización subcelular es exclusivamente extracelular; la proteína se secreta en el plasma, donde se encuentra normalmente.
• La proteína contiene un péptido señal, múltiples dominios Apple para interacciones proteína-proteína y un dominio de serina proteasa similar a la tripsina; está N-glicosilado y estabilizado por enlaces disulfuro.
• Las variantes genéticas en KLKB1 se asocian con la deficiencia de prekalicreína (rasgo Fletcher), una afección rara con tiempo de tromboplastina parcial activada prolongado, pero que típicamente no presenta tendencia hemorrágica.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 20–300 de la cadena pesada, que contiene los cuatro dominios Apple responsables de la unión a HMWK y superficies cargadas negativamente; esta región está altamente conservada en humano, ratón y rata, lo que sustenta la reactividad cruzada observada.
• Para Western blotting, se puede detectar una banda cerca de 71 kDa (prekalicreína) o ~85 kDa (longitud completa con glicosilación); se recomienda la reducción con DTT/TCEP para resolver las cadenas unidas por enlaces disulfuro.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), considerar la recuperación de antígeno con tampón de citrato (pH 6.0) y un sistema de detección sensible para anticuerpos primarios de conejo; se recomiendan controles de suero preinmune o péptido bloqueador para confirmar la especificidad.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede usar como reactivo de captura o detección; sin embargo, el emparejamiento con un anticuerpo monoclonal contra un epítopo distinto puede mejorar la sensibilidad y especificidad.
• Debido a que la calicreína plasmática es abundante en la sangre, la preadsorción del anticuerpo policlonal contra proteínas de suero de ratón/rata inmovilizadas puede reducir el fondo en aplicaciones con tejidos de roedor si se observa unión no específica.
• Validar el rendimiento en su tipo de muestra específico (plasma, suero, lisado de tejido) incluyendo controles positivos (por ejemplo, calicreína plasmática purificada o plasma activado) y controles negativos (plasma sin KLKB1 o líneas celulares knockout si están disponibles).

CamelBio: Tu puente de abastecimiento integral

CamelBio proporciona a fabricantes de diagnósticos, laboratorios e institutos de investigación acceso sin fisuras a materias primas para IVD, incluyendo pares de anticuerpos validados, anticuerpos monoclonales/policlonales optimizados y reactivos auxiliares a granel. Para investigación en coagulación y sistema de contacto, también podemos conseguir objetivos raros e inmunógenos personalizados bajo solicitud, apoyando proyectos desde el concepto hasta la clínica con suministro confiable y consultoría técnica.