Anticuerpo policlonal anti-Klotho para WB y ELISA - Q9UEF7

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de Klotho

• Klotho (KL) es una proteína de membrana de tipo I de un solo paso, codificada por el gen KL en humanos, y también existe como un péptido secretado generado mediante escisión proteolítica.
• Presenta actividad de beta-glucuronidasa, capaz de hidrolizar beta-D-glucurónidos esteroideos como el 3-beta-D-glucurónido de estradiol, el 3-beta-D-glucurónido de estrona y el 3-beta-D-glucurónido de estriol.
• Klotho actúa como correceptor obligado de FGF23, esencial para la unión del factor de crecimiento de fibroblastos 23 (FGF23) a FGFR1 y para mediar el metabolismo renal de la vitamina D y la reabsorción de fosfato regulados por FGF23.
• El ectodominio soluble de Klotho desprendido funciona como una hormona circulante antienvejecimiento que puede prolongar la vida útil al inhibir la señalización de insulina/IGF1.
• La localización subcelular incluye la membrana celular apical (isoforma unida a la membrana) y la secreción (isoforma soluble), lo que permite funciones autocrinas, paracrinas y endocrinas.
• La expresión tisular es más elevada en el riñón, la placenta, el intestino delgado y la próstata; Klotho soluble está presente en el suero y el líquido cefalorraquídeo, y se encuentra regulado negativamente en ciertos tipos de cáncer y en la enfermedad renal crónica.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la glucosilación, y la proteína se clasifica dentro de las familias de glucosidasas, hormonas e hidrolasas.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado abarca la región N-terminal (aa 1–200) de Klotho humano, que es común a las isoformas de membrana y secretada; tenga esto en cuenta al diseñar los ensayos de detección.
• En el Western blot (WB), Klotho migra alrededor de 116 kDa; incluya controles positivos de lisados de riñón, placenta o próstata (humanos, de ratón o de rata), ya que estos tejidos expresan la proteína.
• Al realizar ELISA, valide la especificidad del anticuerpo utilizando proteína Klotho recombinante o fluidos biológicos en los que Klotho soluble sea abundante, como el suero o el líquido cefalorraquídeo.
• Se predice reactividad cruzada con Klotho de ratón y de rata; sin embargo, se recomienda realizar una alineación de secuencias y pruebas piloto para confirmar una reactividad similar en estas especies.
• Optimice la dilución del anticuerpo y las condiciones de detección para cada aplicación; las diluciones iniciales habituales deben determinarse empíricamente.

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