Anticuerpo Policlonal Anti-KMT2A (Validado por KO) para WB y ELISA - Q03164

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de KMT2A

• La histona-lisina N-metiltransferasa 2A (KMT2A), también conocida como MLL, HRX o ALL-1, es un miembro de la familia de reguladores de cromatina Trithorax. Desempeña un papel esencial en el desarrollo temprano y la hematopoyesis a través de la metilación de la histona H3K4 (PubMed:12453419, PubMed:15960975, PubMed:19187761). Referencias relacionadas: PMID:12453419 PMID:15960975 PMID:19187761
• KMT2A es la subunidad catalítica del complejo MLL1/MLL, que media tanto la metilación de H3K4 como la acetilación de H4K16, regulando así la accesibilidad de la cromatina en los promotores de genes activos.
• Se une a elementos CpG no metilados en las regiones promotoras y ayuda a mantener su estado no metilado. Esta actividad es necesaria para la activación transcripcional de genes diana como HOXA9 (PubMed:20010842, PubMed:20677832). Referencias relacionadas: PMID:20010842 PMID:20677832
• KMT2A promueve la apoptosis inducida por PPP1R15A, destacando un papel en la muerte celular programada (PubMed:10490642). Referencias relacionadas: PMID:10490642
• En el reloj circadiano, KMT2A establece un estado de cromatina permisivo a través de la metilación rítmica de H3K4, lo que facilita el reclutamiento de CLOCK-BMAL1 y la expresión génica circadiana (Por similitud).
• La proteína exhibe actividad de autometilación en la cisteína 3882 en ausencia de sustratos de histona (PubMed:24235145). Referencias relacionadas: PMID:24235145
• KMT2A se localiza predominantemente en el núcleo y se expresa en el corazón, pulmón, cerebro y linfocitos T y B. Se clasifica como un protooncogén y participa frecuentemente en reordenamientos cromosómicos asociados con leucemias agudas.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 752–949 de KMT2A humano, ubicados en la región N-terminal. Este anticuerpo puede detectar KMT2A de longitud completa, así como fragmentos N-terminales o proteínas de fusión derivadas de translocaciones cromosómicas, lo que lo hace potencialmente útil para estudiar leucemias con reordenamiento de MLL.
• Debido al alto peso molecular de KMT2A (~432 kDa), considere el uso de geles SDS-PAGE de bajo porcentaje (p. ej., 6–8%) y tiempos de transferencia húmeda prolongados (>4 horas a 30 V) para western blot. La tinción de Coomassie del gel después de la transferencia puede ayudar a confirmar una migración eficiente de la proteína.
• Para western blot, valide el anticuerpo en líneas celulares o muestras de tejido con knockout (KO) para confirmar la especificidad, según lo indicado por el estado de validación KO. Incluya controles positivos y negativos apropiados.
• En aplicaciones de ELISA, la naturaleza policlonal del anticuerpo proporciona una amplia cobertura de epítopos, pero puede requerir una optimización cuidadosa del bloqueo y lavado para reducir el ruido de fondo.

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