Anticuerpo Policlonado de Conejo Anti-Calpaina 2 [Validado por KO] para WB, IHC-P, ELISA - P17655

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Calpaina-2

• Calpaina-2, también conocida como M-calpaina, es la subunidad catalítica grande de la calpaina-2, una proteasa neutra activada por calcio, codificada por el gen CAPN2. Pertenece a la familia de las peptidasas C2 y funciona como heterodímero con una pequeña subunidad reguladora.
• Como una tiol-proteasa no lisosomal regulada por calcio, cataliza la proteólisis limitada de sustratos involucrados en la remodelación del citoesqueleto y la transducción de señales, desempeñando un papel en la migración, proliferación y diferenciación celular.
• Calpaina-2 escinde proteolíticamente a la miocilina (MYOC) en el residuo Arg-226, un evento de escisión implicado en la regulación de la presión intraocular (PubMed:17650508). Referencias relacionadas: PMID:17650508
• Después de la estimulación neuronal, calpaina-2 escinde a CPEB3, lo que elimina su actividad represora de la traducción, permitiendo así la traducción de los ARNm diana de CPEB3 (Por similitud).
• La localización subcelular es principalmente citoplasmática y está asociada a la membrana celular, lo que coincide con su activación y translocación dependiente de calcio.
• La expresión tisular es ubicua, lo que refleja su papel fundamental en los procesos proteolíticos celulares en múltiples órganos y tipos celulares.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación y escisión autocatalítica, que regulan su actividad y función. Contiene dominios estructurales clave como el dominio catalítico de calpaina y los dominios de unión a calcio, y se clasifica dentro de las familias de tiol proteasas e hidrolasas.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se generó utilizando una proteína de fusión recombinante que abarca los aminoácidos 350–680 de la Calpaina-2 humana (NP_001739.2), una región que cubre parte del dominio catalítico y el dominio de unión a calcio tipo C2. Tenga en cuenta este diseño de inmunógeno al validar la reactividad en su sistema modelo.
• Para aplicaciones de Western blot (WB), se espera una banda en el peso molecular predicho de ~80 kDa. Tenga en cuenta que la calpaina-2 puede sufrir procesamiento autocatalítico, lo que podría generar fragmentos adicionales de menor peso molecular.
• El anticuerpo también es adecuado para inmunohistoquímica (IHC-P) y ELISA. Al realizar IHC, incluya controles adecuados y optimice las condiciones de recuperación de antígeno para los tejidos de interés.
• Se ha observado reactividad cruzada con muestras humanas, de ratón y de rata. Para otras especies, verifique la homología de secuencia, particularmente en la región del inmunógeno, antes de su uso.
• Dado que la actividad de la calpaina-2 depende de calcio, considere la concentración de calcio en sus buffers de lisis y condiciones experimentales, ya que puede afectar la autólisis de la proteasa y la disponibilidad del epítopo.

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