Anticuerpo Policlonal Anti-KPNA4 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O00629

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de KPNA4

• KPNA4 codifica la subunidad alfa-3 de importina (también conocida como importina alfa Q1, Qip1 o subunidad alfa-4 de la carioferina), una proteína adaptadora de 58 kDa esencial para la importación nuclear clásica. Referencias relacionadas: PMID:20818336
• Su función consiste en unirse a sustratos que contienen señales de localización nuclear (NLS) simples o bipartitas y enlazarlas a importina beta (KPNB1) para su transporte a través del complejo del poro nuclear (NPC). Referencias relacionadas: PMID:20818336, PMID:28760339, PMID:29042532
• El complejo importina-sustrato se acopla al NPC mediante interacciones entre KPNB1 y nucleoporinas y se transloca de manera dependiente de Ran-GTP que requiere energía; la direccionalidad se obtiene por la distribución asimétrica de Ran-GTP y Ran-GDP. Referencias relacionadas: PMID:20818336, PMID:28760339, PMID:29042532
• KPNA4 media la importación nuclear de diversos cargamentos, entre ellos AARS1, MRTFA y RANBP3, y también facilita la entrada nuclear de proteínas virales como la UL84 del citomegalovirus humano mediante el reconocimiento de NLS no clásicas. Referencias relacionadas: PMID:10567565, PMID:20818336, PMID:28760339
• Subcelularmente, KPNA4 se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, lo que coincide con su papel en el transporte de cargamento al interior del núcleo.
• La proteína se expresa de forma elevada en testículo, ovario, intestino delgado, corazón, músculo esquelético, pulmón y páncreas, con baja expresión en riñón, timo, colon y leucocitos de sangre periférica.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y fosforilación; la proteína contiene dominios de repetición Armadillo esenciales para la unión a NLS y está clasificada como miembro del proteoma de referencia involucrado en el transporte de proteínas y las interacciones huésped-virus.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno se dirige a los aminoácidos 1–240 del extremo N-terminal de KPNA4 humana, lo que puede conferir especificidad por la subunidad alfa de importina frente a otros miembros de la familia de las carioferinas; sin embargo, se recomienda realizar una validación en el sistema de modelo correspondiente.
• Para transferencia Western, se espera una banda cercana a 58 kDa en condiciones reductoras; se aconseja titular la concentración del anticuerpo para obtener una relación señal-ruido óptima.
• En inmunocitoquímica e inmunofluorescencia, dado que KPNA4 realiza transporte entre el citoplasma y el núcleo, ambos compartimentos pueden presentar tinción; la acumulación nuclear puede ser más prominente en determinadas condiciones.
• Para inmunohistoquímica en secciones de parafina, la recuperación de antígeno y la optimización en arreglos de tejidos que contienen tejidos con alta y baja expresión (por ejemplo, testículo frente a riñón) pueden ayudar a confirmar la especificidad.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con ratón y rata, por lo que es adecuado para estudios de ortólogos; no obstante, la reactividad cruzada debe verificarse en el lisado de cada especie.
• Cuando se usa para ELISA, debe tenerse en cuenta que los anticuerpos policlonales pueden proporcionar una cobertura de epítopes más amplia, pero también pueden presentar mayor fondo; la optimización de los pasos de bloqueo y lavado es fundamental.

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