Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-KRAS+HRAS+NRAS para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P01111/P01112/P01116

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de KRAS+HRAS+NRAS

• NRAS funciona como un transductor de señales en la vía de señalización RAS-MAPK, regulando la proliferación y supervivencia celular a través de la unión cíclica de GDP/GTP y la actividad GTPasa intrínseca (PubMed:30712867).
  Referencias relacionadas: PMID:30712867
• KRAS, HRAS y NRAS comparten una alta similitud de secuencia, particularmente en el dominio N-terminal (aa 1-100), que es la región del inmunógeno, lo que permite que este anticuerpo detecte las tres isoformas.
• Las mutaciones oncogénicas en NRAS (comúnmente en los codones 12, 13 y 61) son frecuentes en cánceres humanos, y el anticuerpo reconoce tanto las formas de tipo salvaje como mutantes, lo que lo hace valioso para la investigación oncológica.
• NRAS se localiza principalmente en la membrana plasmática y el aparato de Golgi, donde media eventos de señalización en estos sitios.
• Las modificaciones post-traduccionales, como la prenilación y la palmitoilación, son críticas para el direccionamiento a la membrana y la actividad biológica de NRAS.
• La ligasa de ubiquitina E3 LZTR1 media la ubiquitinación de NRAS, lo que conduce a la degradación proteasomal y sirve como un mecanismo regulador (PubMed:40934300).
  Referencias relacionadas: PMID:40934300

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 1-100 de Ras humano (P01111), una región conservada en KRAS, HRAS y NRAS. Considere validar la especificidad utilizando líneas celulares de knockdown o knockout específicas de isoforma si es necesario.
• Para western blotting (WB), se espera una banda alrededor de 21 kDa en condiciones reductoras. Incluya controles de carga apropiados y considere usar buffer de lisis RIPA para una extracción efectiva de Ras asociado a la membrana.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC), las proteínas Ras se observan típicamente en la membrana plasmática y el Golgi; se requiere permeabilización. No se espera tinción nuclear.
• Para inmunoprecipitación (IP), use buffers de lisis optimizados que contengan detergentes no iónicos e inhibidores de proteasa/fosfatasa para preservar las interacciones proteína-proteína. El pre-aclarado y la titulación del anticuerpo pueden mejorar la especificidad.
• El rendimiento de ELISA debe evaluarse con proteína Ras recombinante o lisados celulares; el límite de detección dependerá del formato del ensayo y del sistema de detección utilizado.

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