Anticuerpo policlonal de conejo anti-Ku70 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P12956

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Ku70

• Ku70 (XRCC6) es una proteína clave de unión al ADN que media la reparación de roturas de doble cadena (DSB) del ADN a través de la vía clásica de unión de extremos no homólogos (NHEJ). Forma un heterodímero con Ku80 (XRCC5) para crear el complejo Ku, que reconoce y se une específicamente a los extremos del ADN roto, sirviendo como andamio para reclutar factores de reparación esenciales. (PubMed:11493912, PubMed:20493174, PubMed:33854234) Referencias relacionadas: PMID:11493912, PMID:20493174, PMID:33854234
• La vía NHEJ dependiente de Ku es fundamental para la recombinación V(D)J, el proceso que genera la diversidad de anticuerpos y receptores de células T, destacando su papel esencial en la inmunidad adaptativa. (PubMed:9742108) Referencias relacionadas: PMID:9742108
• Ku70 posee actividad 5'-desoxirribosa-5-fosfato (5'-dRP) liasa, que limpia los sitios abásicos cerca de las DSB para preparar los extremos del ADN para la ligación. Los estudios in vitro también sugieren una actividad de ADN helicasa 3'-5', aunque su relevancia fisiológica sigue sin estar clara. (PubMed:20383123, PubMed:7957065) Referencias relacionadas: PMID:20383123, PMID:7957065
• Más allá de la reparación, Ku70 contribuye al mantenimiento de los telómeros y actúa como cofactor transcripcional para varios factores de transcripción, vinculando la reparación del ADN con procesos celulares más amplios. (PubMed:29490055, PubMed:12145306, PubMed:8621488) Referencias relacionadas: PMID:29490055, PMID:12145306, PMID:8621488
• Ku70 desempeña un papel en la inmunidad antiviral innata al ensamblar el complejo HDP-RNP, que facilita la fosforilación de IRF3 y la activación de la vía cGAS-STING. (PubMed:28712728) Referencias relacionadas: PMID:28712728
• También puede unirse a ARN celulares y reclutar PRKDC para participar en la biogénesis del ARN ribosomal, lo que indica versatilidad funcional. (PubMed:32103174) Referencias relacionadas: PMID:32103174
• Ku70 regula negativamente la apoptosis al interactuar con BAX y secuestrarlo lejos de las mitocondrias; también puede desubiquitinar a BAX. (PubMed:15023334, PubMed:18362350, PubMed:35545041) Referencias relacionadas: PMID:15023334, PMID:18362350, PMID:35545041
• Subcelularmente, Ku70 es principalmente nuclear y está asociado a los cromosomas, pero también puede encontrarse en el citoplasma bajo ciertas condiciones, lo que es consistente con sus múltiples funciones.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 501-600 de Ku70 humano. Se espera que esta región interna genere anticuerpos que reconozcan la proteína nativa de longitud completa. Considere validar la especificidad del anticuerpo utilizando lisados celulares de knockdown o knockout.
• Dadas las aplicaciones enumeradas (WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA), es recomendable optimizar las diluciones experimentalmente para cada ensayo. Para Western blot, se espera una banda de alrededor de 70 kDa; el uso de condiciones reductoras es típico para este objetivo.
• Se informa de reactividad cruzada con Ku70 de ratón y rata; los usuarios deben confirmar el rendimiento en sus sistemas de muestra específicos. Para IHC e IF, se deben probar protocolos adecuados de fijación y permeabilización.
• Como los anticuerpos policlonales pueden presentar variaciones entre lotes, incluya controles positivos y negativos adecuados en todos los experimentos.

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