Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Ku80 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P13010

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Ku80

• La proteína Ku80, también conocida como XRCC5, KU86, KUB2 o NFIV, es la subunidad de 86 kDa del autoantígeno Ku, un complejo heterodimérico de unión al ADN esencial para la reparación de roturas de doble cadena del ADN (DSB) a través de la vía clásica de unión de extremos no homólogos (NHEJ). Junto con XRCC6 (Ku70), forma el heterodímero Ku70:Ku80 que se une directamente a los extremos de las DSB y sirve como andamio para ensamblar la maquinaria central de reparación NHEJ, incluyendo PRKDC (DNA-PKcs), para alinear y ligar los extremos rotos del ADN. Referencias relacionadas: PMID:11493912, PMID:33854234, PMID:34352203
• Ku80 es indispensable para la recombinación V(D)J, un proceso especializado impulsado por NHEJ que genera el repertorio diverso de receptores de células T e inmunoglobulinas durante el desarrollo de los linfocitos. Referencias relacionadas: PMID:9742108
• Además de su papel estructural, Ku80 posee actividad liasa 5'-desoxirribosa-5-fosfato, que limpia sitios abásicos cerca de los extremos de las DSB para prepararlos para la ligadura. También se ha reportado una actividad de helicasa de ADN 3'-5', aunque su significado in vivo sigue siendo incierto. Referencias relacionadas: PMID:20383123, PMID:7957065
• Ku80 está implicado en el mantenimiento de los telómeros, contribuyendo a la protección y regulación de los extremos de los cromosomas. Referencias relacionadas: PMID:29490055
• Más allá de la reparación del ADN, Ku80 funciona como un cofactor transcripcional, regulando la expresión génica al interactuar con varios factores de transcripción. Referencias relacionadas: PMID:12145306, PMID:8621488
• Ku80 participa en la respuesta inmune innata a los virus de ADN al ensamblarse en el complejo HDP-RNP, que actúa como una plataforma para la fosforilación de IRF3 y activa la vía cGAS-STING. Referencias relacionadas: PMID:28712728
• Ku80 puede unir ARN celulares y reclutar PRKDC, desempeñando un papel en la biogénesis de los ribosomas, particularmente a través de la interacción con el ARN nucleolar pequeño U3. Referencias relacionadas: PMID:32103174
• Localizado predominantemente en el núcleo y el nucleolo, Ku80 se asocia con la cromatina y está sujeto a múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo acetilación, fosforilación, ADP-ribosilación y conjugación tipo ubiquitina.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Diseño del inmunógeno: El anticuerpo se generó contra un péptido sintético que abarca los aminoácidos 633–732 de Ku80 humano. Al diseñar experimentos de validación, considere que esta región puede estar sujeta a modificaciones postraduccionales o eventos de empalme alternativo que podrían afectar la unión del anticuerpo.
• Western blotting (WB): Espere una banda específica de aproximadamente 83 kDa en lisados de células humanas. Incluya controles positivos y negativos apropiados (por ejemplo, muestras con knockout de Ku80 o tratadas con siRNA) para confirmar la especificidad.
• Immunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC): Ku80 exhibe localización nuclear y nucleolar. Optimice las condiciones de fijación y permeabilización para su tipo de tejido o célula, y valide la tinción con un marcador nuclear conocido.
• Inmunoprecipitación (IP): Este anticuerpo se puede utilizar para precipitar el complejo Ku70/Ku80. La co-inmunoprecipitación de Ku70 (XRCC6) sirve como control funcional.
• ELISA: Adecuado para formatos ELISA directos o tipo sándwich. Valide la reactividad cruzada con otras especies si es necesario, ya que el anticuerpo está especificado para reactividad humana.

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