Anticuerpo monoclonal Anti-Lamina A/C para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P02545

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Lamin A/C

• La Lamin A y la Lamin C son componentes principales de la lámina nuclear, una red filamentosa subyacente a la membrana nuclear interna, y están codificadas por el gen LMNA mediante splicing alternativo.
• Proporcionan soporte estructural a la envoltura nuclear, conectan la cromatina con la envoltura nuclear y regulan el ensamblaje nuclear, la organización de la cromatina y la dinámica de los telómeros. Referencias relacionadas: PMID:10080180, PMID:10580070, PMID:10587585
• Las laminas participan en la reparación del ADN: Lamin A/C se recluta a las roturas de doble hebra del ADN por XRCC4 e IFFO1, inmovilizando los extremos rotos del ADN para prevenir translocaciones cromosómicas. Referencias relacionadas: PMID:31548606
• Lamin A/C regula la rigidez de la matriz al conferir propiedades mecánicas al núcleo, influyendo en la migración y diferenciación celular. Referencias relacionadas: PMID:23990565, PMID:25127216
• La localización subcelular incluye: lámina nuclear, envoltura nuclear, nucleoplasma, matriz nuclear y gránulos nucleares.
• Modificaciones postraduccionales como la prenilación, metilación, fosforilación, acetilación y formación de enlaces isopépticos regulan el ensamblaje y la función de las laminas.
• De forma específica por tejido, la prelamina-A/C se acumula en las células del músculo liso vascular envejecidas y en las lesiones ateroscleróticas, contribuyendo a la senescencia celular. Referencias relacionadas: PMID:20458013
• Las mutaciones en LMNA causan laminopatías, que incluyen la distrofia muscular de Emery-Dreifuss, la miocardiopatía dilatada, la lipodistrofia y los síndromes de progeria.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 403–572, que corresponden al dominio de la cola C-terminal común a la lamin A y C, el cual está menos conservado entre las proteínas de filamento intermedio, lo que sugiere una alta especificidad.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de ~74 kDa para la lamin A y ~65 kDa para la lamin C; se pueden detectar ambas bandas. Validar usando extractos nucleares de líneas celulares humanas, de ratón o de rata.
• Para IHC-P y IF/ICC, se espera tinción en la envoltura nuclear y el nucleoplasma. Puede ser necesaria la optimización de la recuperación de antígeno y la permeabilización para tejidos fijados con formol.
• Para IP y ELISA, el anticuerpo se puede usar para enriquecer complejos de lamin A/C; sin embargo, las condiciones de bloqueo y lavado deben determinarse empíricamente.
• Dada la validación por KO, este anticuerpo es adecuado para confirmar el agotamiento de lamin A/C y estudiar los fenotipos de pérdida de función en ensayos de organización nuclear y reparación del ADN.

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