Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-LC3A/LC3B para WB - Q9GZQ8/Q9H492

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de LC3A/LC3B

• La proteína 1 asociada a microtúbulos cadena ligera 3 beta (LC3B, también conocida como ATG8F) es un modificador tipo ubicuitina que desempeña un papel central en la autofagia, específicamente en la formación de vacuolas autofagosómicas (autofagosomas). Referencias relacionadas: PMID:20418806, PMID:23209295, PMID:28017329
• LC3B es crítica para la mitofagia, un proceso de autofagia selectiva que elimina las mitocondrias dañadas; tras la fisión mitocondrial y el estrés celular, LC3B se une a ceramidas C-18 para anclar los autofagolisosomas a las membranas mitocondriales externas. Referencias relacionadas: PMID:23209295, PMID:28017329, PMID:22922758
• LC3B promueve la ciliogénesis primaria eliminando OFD1 de los satélites centriolares a través de la vía autofágica. Referencias relacionadas: PMID:24089205
• A través de la interacción con el receptor de reticulofagia TEX264, LC3B participa en la remodelación del retículo endoplasmático en autofagosomas durante el estrés por nutrientes, los cuales posteriormente se fusionan con lisosomas para el recambio del RE. Referencias relacionadas: PMID:31006537, PMID:31006538
• Ante el estrés por nutrientes, LC3B recluta directamente al factor de nucleación de actina JMY a las superficies de la membrana del forisoma, promoviendo la nucleación de actina y la biogénesis de autofagosomas. Referencias relacionadas: PMID:30420355
• A nivel subcelular, LC3B se encuentra en membranas de autofagosomas, vesículas citoplasmáticas, el sistema de membranas internas, membranas mitocondriales y el citoesqueleto.
• LC3B se expresa más abundantemente en el corazón, el cerebro, el músculo esquelético y los testículos, con poca expresión en el hígado.
• LC3B se clasifica dentro de la vía de autofagia y conjugación tipo ubicuitina; existe como una lipoproteína y fosfoproteína, destacando sus modificaciones regulatorias. Este anticuerpo también reconoce LC3A (MAP1LC3A), un parálogo estrechamente relacionado con funciones conservadas en la autofagia.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético del extremo N-terminal (aa 1-60) de LC3A humana, una región muy conservada con LC3B. Se espera reactividad cruzada con las formas LC3A y LC3B debido a la homología de secuencia.
• En la transferencia Western (Western blotting), pueden detectarse tanto la forma no lipidada (LC3-I) como la lipidada (LC3-II); LC3-II migra ligeramente más bajo (~14-16 kDa) en SDS-PAGE. Realice los controles apropiados (p. ej., inducción de autofagia por inanición o inhibidores) para distinguir las formas.
• Para aplicaciones de inmunofluorescencia, optimice las condiciones de fijación y permeabilización, ya que LC3 a menudo decora estructuras autofágicas (puntos). La tinción simultánea con marcadores lisosomales puede ayudar a confirmar el flujo autofágico.
• En inmunohistoquímica, puede ser necesaria la recuperación de antígeno debido a la ubicación del epítopo. Valide la especificidad del anticuerpo utilizando knockdown con si/shARN o péptido de bloqueo cuando sea posible.

CamelBio: Su Puente de Abastecimiento Integral

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