Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-LCK para WB, IHC-P, ELISA - P06239

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de LCK

• LCK es una tirosina quinasa específica de linfocitos de 56 kDa (p56lck) y miembro de la familia Src. Contiene dominios SH2 y SH3 y se ancla a la membrana plasmática mediante miristoilación y palmitoilación en el extremo N-terminal.
• LCK se asocia constitutivamente con las colas citoplasmáticas de los correceptores CD4 y CD8. Tras la unión del TCR, LCK es reclutada al complejo TCR-CD3, donde fosforila residuos de tirosina dentro de los ITAMs de las cadenas CD3 y TCRζ, iniciando la señalización descendente. Referencias relacionadas: PMID:2470098, PMID:40592325
• Esta quinasa fosforila y activa ZAP70, conduciendo a la activación de linfocitos y producción de linfoquinas. LCK también participa en la señalización del receptor de IL-2 y fosforila otros sustratos como RUNX3, PTK2B y RHOH. Referencias relacionadas: PMID:2470098
• LCK se expresa específicamente en células linfoides y está presente durante todo el desarrollo de los timocitos, regulando los puntos de control de maduración tanto del pre-TCR como del TCR αβ maduro.
• Subcelularmente, LCK se localiza en el lado citoplasmático de la membrana celular y en el citosol, donde está preparada para interactuar con receptores de superficie.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen anclajes lipídicos N-terminales (miristato y palmitato), múltiples eventos de fosforilación (autofosforilación en Tyr394 y fosforilación inhibitoria en Tyr505 por CSK) y ubiquitinación. El empalme alternativo produce isoformas.
• LCK está implicada en enfermedades; las reordenaciones cromosómicas que involucran a LCK se asocian con linfomas de células T, y las mutaciones en la línea germinal pueden causar inmunodeficiencia combinada severa. Proteínas virales como la Nef del VIH-1 se dirigen a LCK para modular la función de las células T.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno (aa 1-240) cubre los dominios únicos N-terminales y SH3, que están menos conservados entre los miembros de la familia Src; este diseño puede mejorar la especificidad para LCK.
• Para WB, se espera una banda de aproximadamente 56-58 kDa en lisados de células linfoides (p. ej., Jurkat, PBMCs humanos, esplenocitos de ratón). Optimice la preparación de la muestra y la dilución del anticuerpo para su sistema.
• Para IHC-P, puede ser necesario el recuperado de antígeno; los tejidos de control positivo incluyen timo humano o ganglio linfático. Valide la tinción en muestras experimentales relevantes.
• El anticuerpo reacciona de forma cruzada con LCK de ratón y rata; si utiliza otras especies, verifique la reactividad de forma independiente.
• Como anticuerpo policlonal, se debe evaluar la consistencia entre lotes; es adecuado para aplicaciones de ELISA cuando se empareja con anticuerpos secundarios apropiados.

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