Anticuerpo policlonal anti-LHPP para WB, IF/ICC, ELISA - Q9H008

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de LHPP

• LHPP (fosfatasa de fosfolisina fosfohistidina pirofosfato inorgánico) es una hidrolasa que desfosforila específicamente los residuos de fosfohistidina y fosfolisina, regulando la señalización de la fosforilación de histidina en proteínas.
• Presenta una amplia especificidad de sustrato y también hidroliza el difosfato inorgánico (PPi) y el imidodifosfato, aunque con una menor eficiencia catalítica.
• Localizada tanto en el citoplasma como en el núcleo, LHPP puede participar en diversos procesos celulares, incluida la regulación metabólica y las funciones asociadas a la cromatina.
• La expresión tisular es más elevada en el cerebro, mientras que se detectan niveles inferiores en el hígado y el riñón; la expresión en la tiroides está confirmada a nivel proteico, lo que sugiere funciones específicas de cada órgano.
• La enzima requiere magnesio u otros iones metálicos divalentes para su actividad, como indican los motivos de unión a metales y los estudios estructurales.
• El corte y empalme alternativo genera múltiples isoformas de LHPP, lo que puede contribuir a la diversidad funcional en diferentes tejidos o etapas del desarrollo.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca casi toda la longitud de la proteína (aa 1-270), por lo que el anticuerpo puede reconocer múltiples isoformas y conformaciones; valide la especificidad utilizando controles adecuados.
• Para Western blot, el peso molecular previsto es de aproximadamente 29 kDa; incluya marcadores de peso molecular y considere el uso de inhibidores de fosfatasas durante la lisis para preservar los estados de fosforilación de la diana.
• En inmunofluorescencia/ICC, optimice las condiciones de fijación (por ejemplo, PFA al 4 %) y permeabilización (por ejemplo, Triton X-100 al 0,1 %) para detectar las fracciones nucleares y citoplasmáticas.
• La reactividad cruzada con ratón y rata permite realizar estudios traslacionales; confirme las diluciones óptimas y la compatibilidad de las muestras en cada especie.
• El ELISA basado en proteína recombinante puede utilizarse para la titulación y el análisis de especificidad; después de la validación, el anticuerpo es adecuado como reactivo de captura o de detección.

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