Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-LIN28B para WB, IP, IHC-P, ELISA - Q6ZN17

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de LIN28B

• LIN28B actúa como un supresor de la biogénesis de microARN, dirigido específicamente a los miARN de la familia let-7. Se une a los transcritos primarios de let-7 (pri-let-7) y los secuestra en el nucléolo, protegiéndolos del complejo microprocesador e impidiendo su maduración (PubMed:22118463).
  Referencias relacionadas:
  PMID:22118463
• Esta represión de la expresión de let-7 es crítica para el desarrollo normal y ayuda a mantener la pluripotencia en las células madre embrionarias al inhibir las señales de diferenciación.
  Referencias relacionadas:
  PMID:22118463
• Tras la sobreexpresión, LIN28B puede reclutar la uridililtransferasa ZCCHC11/TUT4 a los transcritos pre-let-7, lo que conduce a la uridilación terminal y la degradación de los precursores de miARN (PubMed:19703396).
  Referencias relacionadas:
  PMID:19703396
• La proteína contiene dos dominios de dedo de zinc y un dominio de choque frío, clasificándola como una proteína de unión a ARN involucrada en el silenciamiento génico mediado por ARN.
• LIN28B se localiza predominantemente en el nucléolo y el núcleo, pero también puede desplazarse al citoplasma, lo cual es esencial para su función en el procesamiento de miARN.
• El análisis de expresión tisular revela niveles altos en la placenta, con menor expresión en los testículos y el hígado fetal. Se observan patrones de expresión de isoformas distintos en el carcinoma hepatocelular.
• El gen sufre splicing alternativo, produciendo al menos dos isoformas: la isoforma 1 promueve el crecimiento celular, mientras que la isoforma 2 no, lo que sugiere una divergencia funcional.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación, y la proteína se identifica como un marcador de proteómica; también presenta una entrada de estructura 3D.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno para este anticuerpo cubre los aminoácidos 1-163 del LIN28B humano, dirigido a la región N-terminal. Esta región incluye el dominio de choque frío y es conservada en las isoformas reportadas, lo que potencialmente permite la detección tanto de la isoforma 1 como de la isoforma 2. Sin embargo, se recomienda la validación en el sistema de muestra específico.
• Para la transferencia Western (WB), se espera una banda de aproximadamente 27 kDa. Asegúrese de una extracción de proteínas adecuada, ya que LIN28B es predominantemente nuclear y nucleolar; considere el uso de tampón RIPA o kits de extracción nuclear para mejorar la solubilidad.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), anticipe patrones de tinción nuclear y nucleolar. Utilice métodos de recuperación de antígenos apropiados y valide la tinción con tejidos de control positivos como la placenta o tejidos cancerosos donde LIN28B se expresa altamente.
• Para la inmunoprecipitación (IP), el formato monoclonal de conejo proporciona alta especificidad y afinidad. Optimice la concentración de anticuerpo y las condiciones de incubación para la línea celular objetivo o el lisado tisular.
• Este anticuerpo está validado para muestras humanas; no se ha informado reactividad cruzada con otras especies. Los investigadores deben verificar la reactividad si utilizan especímenes no humanos.

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