Anticuerpo policlonal anti-LOXL2 para WB, ELISA - Q9Y4K0

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de LOXL2

• LOXL2 (lisil oxidasa homóloga 2) es una amina oxidasa dependiente de cobre que media la desaminación oxidativa de residuos de lisina. Actúa como correpresor transcripcional al desaminar específicamente la 'Lys-4' trimetilada de la histona H3 (H3K4me3) y también desamina TAF10 para liberarlo de los promotores, inhibiendo la transcripción dependiente de TFIID. Referencias relacionadas: PMID:27735137 PMID:25959397
• Presenta una estricta especificidad de sustrato: solo actúa sobre H3K4me3 y no sobre H3K9me3, H3K27me3 ni H3K4 parcialmente metilada, lo que destaca su función precisa en la regulación transcripcional epigenética. Referencias relacionadas: PMID:27735137
• LOXL2 es un mediador clave de la transición epitelial-mesenquimal (EMT). Interactúa con SNAI1 para reprimir la expresión de E-cadherina (CDH1), probablemente mediante la desaminación de la histona H3. LOXL2 también se une a HSPA5 del retículo endoplasmático, activando la vía IRE1-XBP1 para promover la EMT. Referencias relacionadas: PMID:16096638 PMID:24414204 PMID:27735137 PMID:28332555
• En condiciones de hipoxia, LOXL2 reprime la E-cadherina, contribuyendo a la agresividad tumoral. Se encuentra frecuentemente sobreexpresada en diversos tipos de cáncer, lo que sugiere una función en la progresión tumoral. Referencias relacionadas: PMID:20026874
• La LOXL2 secretada actúa en la matriz extracelular, entrecruzando el colágeno y la elastina mediante la desaminación oxidativa de lisinas peptidílicas. También regula la angiogénesis por gemación mediante el andamiaje de colágeno IV. Referencias relacionadas: PMID:20306300 PMID:21835952
• La enzima contiene un cofactor lisil-tirosilquinona (LTQ) esencial para su actividad catalítica, formado mediante el entrecruzamiento postraduccional de residuos de lisina y tirosina. También se une al cobre y presenta múltiples enlaces disulfuro y sitios de glicosilación.
• La localización subcelular es dual: LOXL2 se secreta hacia la matriz extracelular y la membrana basal, pero también se encuentra en el núcleo, los cromosomas y el retículo endoplasmático, en consonancia con sus funciones de regulación transcripcional y extracelular.
• LOXL2 se expresa ampliamente, con los niveles más altos en tejidos reproductivos (placenta, útero, próstata). Su expresión está elevada en las capas del epitelio esofágico y en numerosos carcinomas, lo que la convierte en un posible biomarcador. Referencias relacionadas: PMID:10212285 PMID:22204712

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 51–290 e incluye parte del dominio catalítico de LOX. Esta región puede detectar isoformas de LOXL2 tanto de longitud completa como truncadas; valide la especificidad del anticuerpo en su sistema objetivo.
• Para Western blot (WB), prepare los lisados con inhibidores de proteasas y fosfatasas, y utilice un control de carga compatible con la banda esperada de 87 kDa. Confirme la reactividad con muestras humanas, de ratón y de rata, tal como se indica.
• En aplicaciones de ELISA, considere combinarlo con un anticuerpo de detección que reconozca un epítopo de LOXL2 no solapado para ensayos tipo sándwich. Optimice empíricamente las condiciones de recubrimiento, bloqueo y detección.
• Dado que LOXL2 se localiza tanto en compartimentos nucleares como secretados, seleccione tampones de lisis y métodos de fraccionamiento adecuados para su tipo de muestra con el fin de garantizar la recuperación de la diana.

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