Anticuerpo Policlonal Anti-LRRK2 para WB, IHC-P, ELISA - Q5S007

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de LRRK2

• LRRK2 (quinasa de serina/treonina de repeticiones ricas en leucina 2), también conocida como Dardarina, es una proteína grande multidominio que contiene un dominio quinasa, un dominio GTPasa Roc, un dominio COR y repeticiones WD40. Presenta actividades tanto de serina/treonina quinasa como de GTPasa. Referencias relacionadas: PMID:18230735
• LRRK2 fosforila una amplia gama de proteínas, incluyendo las GTPasas RAB (RAB3A/B/C/D, RAB5A/B/C, RAB8A/B, RAB10, RAB12, RAB29, RAB35, RAB43), PRDX3, APP y RIPK2, regulando la plasticidad neuronal, la autofagia, la inmunidad innata y el tráfico de vesículas. Referencias relacionadas: PMID:23395371, PMID:26824392, PMID:28720718, PMID:21850687, PMID:27830463
• Actúa como regulador clave de la ciliogénesis primaria al fosforilar RAB8A y RAB10, promoviendo así la señalización de Sonic Hedgehog (SHH) en el cerebro. Referencias relacionadas: PMID:29125462, PMID:30398148
• Regula positivamente la autofagia a través de una activación dependiente de calcio de la vía de señalización CaMKK/AMPK, que implica la liberación de calcio lisosomal. Referencias relacionadas: PMID:22012985
• Las mutaciones en LRRK2 están vinculadas a la enfermedad de Parkinson familiar y esporádica, lo que la convierte en un objetivo clave para la investigación en neurodegeneración.
• Subcelularmente, LRRK2 se localiza en vesículas citoplasmáticas, el aparato de Golgi, endosomas, lisosomas, mitocondrias, vesículas sinápticas, fagosomas y el citoesqueleto, y se encuentra en cuerpos celulares neuronales, axones y dendritas.
• Especificidad tisular: Altamente expresada en el cerebro, particularmente en neuronas piramidales de la corteza visual, la sustancia nigra pars compacta y el putamen caudado; también se expresa en corazón, hígado, placenta, pulmón, músculo esquelético, riñón y páncreas (a nivel de proteína). Referencias relacionadas: PMID:29127255
• LRRK2 participa en la vía de tráfico retrógrado desde los lisosomas hasta el Golgi, interactuando con RAB29 y el complejo retromero para reciclar proteínas como M6PR. Referencias relacionadas: PMID:23395371
• Tras ser reclutado por RAB29 a lisosomas sobrecargados, LRRK2 fosforila y estabiliza RAB8A y RAB10, promoviendo la liberación del contenido lisosomal y regulando la morfología lisosomal a través de EHBP1 y EHBP1L1. Referencias relacionadas: PMID:30209220, PMID:38227290

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para Western blotting, considere usar un gel de SDS-PAGE al 6-8% y tiempos de transferencia prolongados debido al alto peso molecular de LRRK2 (~286 kDa).
• Valide la especificidad del anticuerpo usando lisados celulares o tejidos con knockout o knockdown de LRRK2, especialmente en modelos de cerebro o células inmunes.
• Para IHC-P, optimice la recuperación de antígeno y la dilución del anticuerpo usando secciones de cerebro humano o de roedor que se sabe que expresan LRRK2, como la sustancia nigra o la corteza.
• En ELISA, use fragmentos recombinantes de LRRK2 o lisados celulares como antígenos de captura, y considere bloquear con BSA o caseína para reducir el fondo.
• Debido a que se trata de un anticuerpo policlonal, tenga en cuenta la posible variabilidad entre lotes; valide cada nuevo lote para verificar su consistencia en su aplicación.

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