Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-LSD2/KDM1B/AOF1 para WB, ELISA - Q8NB78

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de LSD2/KDM1B/AOF1

• LSD2/KDM1B/AOF1 es una desmetilasa de histonas específica de lisina que elimina de forma selectiva los grupos mono y dimetilo de la lisina 4 de la histona H3 (H3K4me1/2), actuando por lo tanto como correpresor transcripcional.
• No muestra actividad frente a H3K4 trimetilado, ni H3K9, H3K27, H3K36 o H4K20 metilados, lo que demuestra una alta especificidad por sustrato.
• La enzima es necesaria para la metilación de novo del ADN de un subconjunto de genes imprintados durante la ovogénesis, lo que lo vincula a la programación epigenética del desarrollo.
• La catálisis se produce mediante oxidación dependiente de FAD del sustrato, formando un intermedio imino que posteriormente se hidroliza.
• Por sí sola, LSD2 tiene una actividad mínima sobre sustratos nucleosomales; la asociación con GLYR1 forma un complejo que desmetila eficientemente H3K4me en nucleosomas, facilitando la transcripción de la Pol II a través de la cromatina. Referencias relacionadas:
  PMID:30970244
• A nivel subcelular, la proteína se localiza en el núcleo y está asociada a los cromosomas, lo que coincide con su papel en la modificación de la cromatina.
• La proteína presenta dominios de dedo de zinc y motivos de unión a FAD, lo que la clasifica como regulador de la cromatina y flavoproteína.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación, y existen múltiples isoformas debido al empalme alternativo.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno se dirige a la región N-terminal (aa 1-100); por lo tanto, las isoformas que carecen de esta región o con truncamientos N-terminales pueden no detectarse. Verifique en los sistemas correspondientes.
• Para Western blot, se recomiendan extractos nucleares para enriquecer esta proteína unida a la cromatina. Optimice la dilución del anticuerpo usando un control positivo, como lisados de células HeLa o HEK-293.
• El peso molecular esperado es de ~92 kDa. Confirme la identidad de la banda con marcadores de peso molecular adecuados y considere el uso de agentes bloqueantes optimizados para fosfoproteínas si estudia formas fosforiladas.
• Se ha observado reactividad cruzada con muestras humanas, de ratón y de rata. Cuando utilice muestras de otras especies, realice experimentos de validación iniciales.
• Para aplicaciones de ELISA, titule la concentración del anticuerpo y confirme la especificidad mediante ensayos de bloqueo con proteína recombinante o péptido.

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