Anticuerpo policlonal de conejo anti-MCM5 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P33992

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de MCM5

• MCM5 (CDC46/P1-CDC46) es el factor de licencia para la replicación del ADN y un componente central del complejo MCM2-7, la helicasa replicativa eucariota esencial para la iniciación y elongación de la replicación del ADN una vez por ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:40940420

• Junto con CDC45 y GINS, MCM5 forma la helicasa CDC45-MCM-GINS (CMG) que desenrolla el ADN dúplex en las horquillas de replicación, sirviendo como plataforma central para el ensamblaje del replisoma. Referencias relacionadas: PMID:16899510, PMID:32453425, PMID:34694004

• El anillo MCM2-7 contiene seis sitios activos de ATPasa formados en las interfaces de subunidades; MCM5 contribuye con un motivo de dedo de arginina conservado al bolsillo de unión a ATP de la subunidad vecina, con contribuciones diferenciales a la actividad de la helicasa. Referencias relacionadas: PMID:32453425

• MCM5 se localiza en el núcleo y se une a la cromatina de manera dependiente del ciclo celular, cumpliendo un papel fundamental en la licencia de replicación y la progresión de la fase S.

• Modificaciones postraduccionales como la acetilación, fosforilación y conjugación con ubiquitina regulan la estabilidad y actividad de MCM5.

• MCM5 es esencial para la estabilidad del genoma; las mutaciones en el gen MCM5 se asocian con el síndrome de Meier-Gorlin 8 (MGORS8) y otros trastornos del desarrollo.

• MCM5 es un miembro de la familia MCM de helicasas dependientes de ATP, comparte dominios conservados con MCM2-7 y se expresa de manera alta en células proliferantes.

• La proteína tiene un peso molecular predicho de ~82 kDa y contiene motivos de unión a nucleótidos fundamentales para su función enzimática.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (proteína recombinante que abarca los aminoácidos 1–230 de MCM5 humano) se dirige a la región N-terminal, que contiene motivos conservados; se ha observado reactividad cruzada con ortólogos de ratón y rata. Para especies no listadas, verifique la homología de secuencia antes de su uso.
• Para Western blot (WB), considere una dilución inicial de 1:500–1:2000 y use lisados nucleares o de células totales de células proliferantes, donde MCM5 es abundante. La banda predicha es de ~82 kDa; tenga en cuenta que la fosforilación puede causar ligeros cambios en la movilidad.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), MCM5 presenta una tinción nuclear dependiente del ciclo celular; optimice las condiciones de fijación y permeabilización para preservar la proteína unida a la cromatina.
• Para inmunoprecipitación (IP), el anticuerpo puede enriquecer MCM5 nativo y su complejo MCM asociado; valide la co-IP de otras subunidades MCM para confirmar la integridad del complejo.

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