Anticuerpo policlonal de conejo anti-MDC1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14676

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de MDC1

• MDC1 (Proteína mediadora del punto de control del daño en el ADN 1), también conocida como NFBD1 (Factor nuclear con dominios BRCT 1), actúa como un lector de histonas que se une específicamente a la histona H2AX fosforilada (γH2AX) en los sitios de roturas de doble cadena del ADN, sirviendo como un andamio molecular para proteínas de reparación del ADN y transducción de señales. Referencias relacionadas: PMID:12475977 PMID:12499369 PMID:12551934
• Tras el daño en el ADN, MDC1 facilita el reclutamiento y retención de factores de reparación del ADN, incluido el complejo MRN (a través de NBN) y TOPBP1, en los focos de daño; es esencial para la posterior fosforilación y activación de las quinasas del punto de control ATM, CHEK1 y CHEK2, lo que conduce a la detención del ciclo celular y la estabilización de p53. Referencias relacionadas: PMID:12607004 PMID:12607005 PMID:15201865 PMID:16049003
• MDC1 contribuye a la estabilidad cromosómica durante la mitosis al promover la formación de filamentos de TOPBP1 que anclan los cromosomas rotos, y es necesaria para la reparación por recombinación homóloga al permitir el reclutamiento de NBN a los DSB. Referencias relacionadas: PMID:18411307 PMID:18582474 PMID:18583988 PMID:30898438
• La proteína se localiza principalmente en el núcleo y se asocia con la cromatina, particularmente en los focos inducidos por daño. Se expresa abundantemente en testículos, lo que sugiere un papel en procesos meióticos o de células germinales.
• MDC1 es una gran fosfoproteína (~227 kDa) que sufre múltiples modificaciones postraduccionales, como acetilación, metilación y ubiquitinación, que regulan su interacción con la maquinaria de reparación del ADN.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas, y la proteína contiene dominios BRCT en tándem que median su unión a proteínas fosforiladas en los sitios de daño.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 1-350) de la MDC1 humana; esta región está fuera de los dominios BRCT, y el anticuerpo puede reconocer la proteína de longitud completa y los fragmentos N-terminales.
• Para Western blot (WB), debido al alto peso molecular (~227 kDa), considere usar geles SDS-PAGE de bajo porcentaje (por ejemplo, gel separador del 6-8%) y un tiempo de transferencia suficiente.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), valide los patrones de tinción en tejidos positivos conocidos (por ejemplo, testículo) o en modelos celulares inducidos por daño en el ADN.
• Se ha reportado el uso del anticuerpo para ELISA, pero las diluciones de trabajo óptimas deben determinarse empíricamente por el usuario final.

CamelBio: Su Puente de Abastecimiento Integral

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