Anticuerpo policlonal anti-ME1 (WB, ELISA) - P48163

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de ME1

• La enzima málica dependiente de NADP (ME1) es una enzima citosólica que cataliza la descarboxilación oxidativa del (S)-malato a piruvato y CO2, utilizando NADP+ como cofactor, y también descarboxila el oxaloacetato.
• La ME1 desempeña un papel fundamental en la biosíntesis de lípidos al proporcionar NADPH para reacciones de reducción y es un vínculo clave entre la glucólisis y el ciclo del ácido cítrico.
• La proteína se expresa de forma ubicua en los tejidos humanos, con niveles notables en el hígado, la placenta y el tejido adiposo blanco.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la acetilación y la fosforilación, que pueden regular la actividad enzimática y la localización subcelular.
• El gen ME1 se somete a un corte y empalme alternativo (splicing), produciendo múltiples variantes de transcritos que contribuyen a la diversidad funcional.
• Los estudios estructurales (estructura 3D disponible) revelan una arquitectura de sitio activo conservada típica de las enzimas málicas, que se une a iones metálicos divalentes y NADP+.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca la región N-terminal (aa 1-300) de la ME1 humana, la cual está bien conservada en humanos, ratones y ratas, lo que es coherente con la reactividad cruzada observada. Valide en el sistema de muestra correspondiente si utiliza otras especies.
• Para Western blot, son adecuados los lisados de células completas de tejidos o líneas celulares que expresan ME1 (por ejemplo, hígado, tejido adiposo o líneas celulares cancerosas); considere utilizar un control positivo como lisados HepG2 o 3T3-L1. Se espera una banda cercana a los 64 kDa.
• Para ELISA, el recubrimiento con proteína ME1 recombinante o el fragmento de péptido inmunógeno puede optimizarse; realice experimentos de titulación para determinar la dilución óptima del anticuerpo y la concentración de recubrimiento.
• Como anticuerpo policlonal, la variación entre lotes puede afectar el rendimiento; es recomendable volver a validar las aplicaciones críticas con cada lote nuevo.

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