Anticuerpo Policlonal Anti-ME2 para WB, ELISA - P23368

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ME2

• ME2 (enzima málica dependiente de NAD, mitocondrial) también se conoce como ODS1 y enzima málica 2. Está codificada por el gen ME2 en humanos.
• Esta enzima cataliza la descarboxilación oxidativa de malato a piruvato, utilizando NAD+ como cofactor. La reacción es clave para vincular el ciclo de TCA con el metabolismo del piruvato y la producción de NADH.
• ME2 es una enzima alostérica y requiere iones metálicos divalentes para su actividad, típicamente Mg2+ o Mn2+, que facilitan la unión del sustrato y la catálisis.
• La proteína se localiza en la matriz mitocondrial, donde funciona en el metabolismo del malato. Se importa a las mitocondrias a través de un péptido de tránsito N-terminal que se escinde después de la translocación.
• El empalme alternativo genera múltiples variantes de transcripción, lo que potencialmente produce isoformas con propiedades regulatorias o patrones de expresión distintos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, que puede regular la actividad o estabilidad de la enzima en respuesta a los estados metabólicos celulares.
• ME2 se expresa ampliamente pero desempeña funciones especializadas en tejidos con alta actividad mitocondrial, como hígado, corazón y cerebro, donde contribuye al metabolismo de lípidos y aminoácidos.
• Las palabras clave de UniProt resaltan sus características: estructura-3D (datos estructurales disponibles), acetilación, enzima alostérica, empalme alternativo, secuenciación directa de proteínas, unión a metales, mitocondria, NAD, oxidorreductasa y proteoma de referencia.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno está diseñado contra la región C-terminal (aa 220-479) de la ME2 humana. Esta región es distinta del péptido de tránsito N-terminal, por lo que se espera que el anticuerpo reconozca la forma mitocondrial madura.
• Como anticuerpo policlonal, puede detectar múltiples isoformas derivadas del empalme alternativo. En Western blot, se espera una banda predominante a ~65 kDa, pero podrían aparecer bandas adicionales dependiendo de la muestra y las condiciones.
• Para WB, el uso de lisados enriquecidos en mitocondrias o tejidos con alto contenido mitocondrial (p. ej., hígado, corazón) puede mejorar la sensibilidad de detección. Optimice las condiciones de bloqueo y lavado para reducir el fondo.
• En ELISA, el anticuerpo se puede utilizar para detección directa o indirecta. Valide con proteína ME2 recombinante o lisados celulares para confirmar la especificidad y determinar la dilución óptima.
• La reactividad cruzada se indica para ME2 humana. Para otras especies, verifique la homología de secuencia en la región del inmunógeno antes de su uso, ya que no se garantiza la reactividad.

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