Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-MEK1 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q02750

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de MEK1

• MEK1 (MAP2K1) es una quinasa de doble especificidad que fosforila tanto residuos de treonina como de tirosina en el bucle de activación de ERK1/2 (MAPK3/1), un paso crítico en la cascada de señalización MAPK/ERK.
• Actúa aguas abajo de RAS-RAF1 y es esencial para transmitir señales desde receptores de la superficie celular a efectores intracelulares, regulando así procesos como la proliferación, diferenciación y supervivencia celular.
• MEK1 activa BRAF a través de un mecanismo dependiente de KSR1/KSR2, liberando la autoinhibición de BRAF y potenciando la propagación de la señal. Referencias relacionadas: PMID:29433126
• Su localización subcelular abarca el citoplasma, el centrosoma, el polo del huso, el núcleo y la membrana, reflejando sus funciones en la mitosis (fragmentación del Golgi), el tráfico endosomal y la exportación nuclear (ej. PPARG).
• Se expresa ampliamente en tejidos humanos, con niveles notablemente bajos en el cerebro. Las mutaciones asociadas a enfermedades están relacionadas con miocardiopatía, displasia ectodérmica y discapacidad intelectual.
• Pertenece a la familia de quinasas MAP quinasa, que incluye a MEK2 (MAP2K2), y está regulada por fosforilación y acetilación.
• La vía MAPK/ERK, impulsada por MEK1, influye en la localización del receptor nuclear PPARG, integrando así señales metabólicas y apoptóticas.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado fue un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 1–100 de MEK1 humano. El mapeo de epítopos sugiere el reconocimiento de la región N-terminal, que está bien conservada; sin embargo, la reactividad cruzada con MEK2 debe excluirse experimentalmente si la especificidad es crítica.
• Para Western blot, se espera una banda alrededor de 43 kDa. Valide utilizando un lisado de control positivo de líneas celulares humanas, de ratón o de rata que se sepa que expresan MEK1 (ej. HeLa, NIH/3T3, PC12).
• Para inmunofluorescencia/ICC, optimice las condiciones de fijación/permeabilización, ya que MEK1 puede ser citosólica, asociada a membrana o nuclear dependiendo del estado celular.
• Para inmunoprecipitación, utilice un tampón de lisis suave para preservar las interacciones proteicas. Considere la reticulación si se desea co-IP de componentes de la vía MAPK.
• Las aplicaciones de ELISA pueden emplear el anticuerpo para la detección de MEK1 recombinante o endógeno; realice titulación e incluya controles apropiados.

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