Anticuerpo policlonal de conejo anti-MELK para WB y ELISA - Q14680

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de MELK

• La quinasa con cremallera de leucina embrionaria materna (MELK), también conocida como quinasa pEg3 o hPK38, es una proteína quinasa de serina/treonina codificada por el gen MELK en humanos. Pertenece a una amplia familia de quinasas implicadas en la regulación del ciclo celular y la apoptosis.
• MELK actúa como activador de la apoptosis al fosforilar y activar MAP3K5/ASK1, promoviendo así la muerte celular programada. También fosforila BCL2L14, inhibiendo su función proapoptótica, lo que puede influir en la carcinogénesis mamaria.
• Como regulador clave del ciclo celular, MELK media la fosforilación de CDC25B, promoviendo su localización en los centrosomas y los polos del huso durante la mitosis, un proceso esencial para la correcta división celular.
• MELK es necesaria para la proliferación de progenitores neurales multipotentes embrionarios y posnatales, lo que destaca su papel en la autorrenovación de las células madre y la neurogénesis.
• La quinasa también participa en la regulación del splicing al fosforilar ZNF622 durante la mitosis, inhibiendo el ensamblaje del espliceosoma y redirigiendo ZNF622 al núcleo.
• Los estudios de localización subcelular indican que MELK está presente en la membrana celular, aunque su actividad quinasa es fundamental en los compartimentos citoplasmáticos y nucleares, dependiendo del contexto celular.
• Los perfiles de expresión tisular muestran que MELK se expresa prominentemente en la placenta, el riñón, el timo, los testículos, los ovarios y el intestino, con posibles funciones en la hematopoyesis primitiva.
• Las modificaciones postraduccionales y las características estructurales incluyen la unión a ATP, dominios de unión al calcio y a lípidos, y múltiples sitios de fosforilación, tal como se recoge en la entrada de palabras clave de fosfoproteínas.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 412–651 de MELK humano, una región que puede proporcionar especificidad de la diana; verifique la alineación de secuencias entre especies si la reactividad cruzada con ratón o rata es importante.
• Para Western blot, se espera detectar una banda de aproximadamente 75 kDa. Considere utilizar intervalos de dilución como 1:500–1:2000, con controles positivos adecuados (por ejemplo, líneas celulares con expresión conocida de MELK), y valide el anticuerpo en su sistema de muestras.
• En ELISA, el rendimiento puede depender de la conformación de la proteína diana y de las condiciones de recubrimiento; considere utilizar proteína MELK recombinante o lisados celulares para determinar las diluciones óptimas del anticuerpo.
• Dado que se ha informado de reactividad cruzada con muestras humanas, de ratón y de rata, deben tenerse en cuenta los patrones de expresión específicos de cada tejido al seleccionar los controles positivos.

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