Anticuerpo policlonal de conejo contra la proteína Spike RBD de MERS-CoV para WB, IF/ICC, ELISA - K9N5Q8

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de la glicoproteína Spike de MERS-CoV

• La glicoproteína Spike (S) media la entrada viral al unirse al receptor huésped DPP4 (dipeptidil peptidasa 4) y facilitar la fusión de membranas (UniProt K9N5Q8).
• Se trata de una proteína de fusión viral de clase I; durante la fusión, sus regiones de bobina enrollada forman una estructura de trímero de horquillas que impulsa la aposición y fusión de membranas.
• La proteína se escinde proteolíticamente en subunidades S1 y S2; el dominio de unión al receptor (RBD, por sus siglas en inglés) se encuentra dentro de S1, mientras que el péptido de fusión en S2 se descubre tras la escisión endosomal.
• Codificado por el gen S, es un factor de virulencia importante y el objetivo principal de los anticuerpos neutralizantes (palabras clave UniProt: Virulencia, Proteína de envoltura viral).
• A nivel subcelular, se localiza en la membrana de la virión, la membrana del compartimento intermedio entre retículo endoplásmico y aparato de Golgi del huésped y la membrana de la célula huésped (Localización subcelular UniProt).
• Las modificaciones postraduccionales incluyen N-glicosilación, formación de enlaces disulfuro y palmitoilación, que son críticas para el plegamiento y la función de la proteína.
• La proteína Spike de longitud completa tiene un peso molecular predicho de aproximadamente 149 kDa (Peso molecular UniProt: 149 411 Da).

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aa 18-725 del RBD) cubre el dominio de unión al receptor fundamental para la interacción con DPP4 huésped; este anticuerpo puede ser adecuado para aplicaciones que estudien la unión entre RBD y su receptor.
• Para Western blot, se espera una banda alrededor de 149 kDa; la glicosilación puede causar ligeros cambios en la movilidad. Se recomienda utilizar controles de desglicosilación si aparecen bandas ambiguas.
• En experimentos de inmunofluorescencia se debe tener en cuenta la localización de la proteína en membranas intracelulares y la superficie celular; los protocolos de permeabilización necesitan optimización para la detección intracelular.
• En configuraciones de ELISA, la proteína recombinante Spike RBD (por ejemplo, YP_009047204.1) puede servir como control positivo para la titulación del anticuerpo y las pruebas de especificidad de unión.

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