Anticuerpo monoclonal de conejo anti-mesotelina para WB, IF-P, ELISA - Q13421

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la mesotelina

• La mesotelina, codificada por el gen MSLN, también se conoce como antígeno CAK1 y factor potenciador de megacariocitos pre-pro, y experimenta un corte y empalme alternativo para producir diferentes isoformas.
• La forma de mesotelina anclada a la membrana puede desempeñar un papel en la adhesión celular, contribuyendo a las interacciones entre células.
• El dominio del factor potenciador de megacariocitos (MPF), liberado después de la escisión, puede potenciar la formación de colonias de megacariocitos in vitro.
• La mesotelina se localiza en la membrana celular, anclada mediante un anclaje GPI, y también se detecta en el aparato de Golgi; puede secretarse después de la escisión proteolítica.
• Se expresa en el tejido pulmonar normal y en niveles bajos en el corazón, la placenta y el riñón; también en las células mesoteliales, y se expresa abundantemente a nivel proteico en mesoteliomas, cánceres de ovario y algunos carcinomas de células escamosas.
• La proteína experimenta varias modificaciones, entre ellas la escisión en un par de residuos básicos, la N-glucosilación, la formación de enlaces disulfuro y la fosforilación.
• Entre sus características estructurales principales se incluyen un péptido señal, un anclaje GPI y la presencia de múltiples dominios identificados mediante estudios de estructura tridimensional.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido sintético que abarca los aminoácidos 500–600 de la mesotelina humana; esta región se encuentra en la parte C-terminal de la proteína. Al utilizar este anticuerpo, tenga en cuenta que puede detectar tanto el precursor de longitud completa como la mesotelina madura o el fragmento MPF, dependiendo del procesamiento de la muestra.
• Para Western blot (WB), se espera una banda de aproximadamente 69 kDa (coherente con los 68 kDa predichos por UniProt) en condiciones reductoras. Valide el peso molecular observado en sus lisados celulares o tisulares específicos.
• En la inmunofluorescencia de cortes incluidos en parafina (IF-P), optimice la recuperación antigénica y la permeabilización para detectar eficazmente la mesotelina asociada a la membrana o localizada en el aparato de Golgi.
• Para aplicaciones de ELISA, evalúe el rendimiento del anticuerpo como reactivo de captura o detección después de realizar pruebas empíricas de combinación, y valídelo frente a mesotelina recombinante o dianas naturales en matrices adecuadas.
• Se ha informado de reactividad cruzada con muestras humanas y de rata; al trabajar con muestras de rata, confirme la especificidad y la sensibilidad en sus condiciones experimentales, ya que la conservación del epítopo puede variar.

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