Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Mesotelina para WB, ELISA - Q13421

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Mesotelina

• La Mesotelina está codificada por el gen MSLN y se produce como una proteína precursora que se escinde en dos productos: el factor potenciador de megacariocitos (MPF) y la mesotelina madura unida a membrana.
• La mesotelina anclada a membrana puede desempeñar un papel en la adhesión celular, posiblemente involucrada en interacciones célula-célula o célula-matriz.
• El factor potenciador de megacariocitos (MPF) actúa como una citocina que puede potenciar la formación de colonias de megacariocitos in vitro, lo que sugiere un papel en la hematopoyesis.
• La proteína se localiza en la membrana celular a través de un anclaje GPI, y también se encuentra en el aparato de Golgi y en formas secretadas tras la escisión y liberación.
• La Mesotelina se expresa en las células mesoteliales que recubren la pleura, el peritoneo y el pericardio; en niveles más bajos en pulmón, corazón, placenta y riñón.
• Está altamente sobreexpresada en mesoteliomas, cánceres de ovario y algunos carcinomas de células escamosas, lo que la convierte en un marcador tumoral y diana terapéutica útil.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la formación de enlaces disulfuro, la glicosilación N-ligada y la unión del anclaje GPI, que son críticas para su estabilidad y asociación a membrana.
• Eventos de empalme alternativo, fosforilación y escisión proteolítica regulan sus múltiples formas funcionales y distribuciones subcelulares.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (aa 296–606) de la Mesotelina humana, que se conserva en ratón (basado en la reactividad cruzada), lo que lo hace adecuado para la detección de muestras humanas y de ratón en WB y ELISA.
• Para Western blot, considere que el precursor de longitud completa (~69 kDa) se escinde, por lo que pueden observarse múltiples bandas dependiendo de la muestra (p. ej., mesotelina madura de ~40 kDa y MPF de ~31 kDa). Valide con proteína recombinante o lisados de líneas celulares de alta expresión (p. ej., líneas de cáncer de ovario como OVCAR-3 o líneas de mesotelioma).
• En ELISA, el anticuerpo puede usarse como reactivo de captura o detección; la concentración óptima de recubrimiento y el emparejamiento con un anticuerpo de detección deben determinarse empíricamente, idealmente usando Mesotelina recombinante como estándar.
• Como anticuerpo policlonal, puede ocurrir variabilidad entre lotes; siempre realice una prueba piloto con controles positivos y negativos para confirmar la reactividad y especificidad.
• Tenga en cuenta que el MPF soluble endógeno en suero o sobrenadantes de cultivo celular podría detectarse; ajuste las condiciones de bloqueo y lavado en consecuencia para reducir el fondo.

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