Anticuerpo monoclonal de conejo anti-METTL3 [validado por KD] para WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ChIP y ELISA - Q86U44

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de METTL3

• METTL3 (subunidad catalítica de la N(6)-adenosina-metiltransferasa) es una proteína de 64 kDa que se localiza en gránulos nucleares y el citoplasma. Forma un complejo heterodimérico con METTL14 que constituye el núcleo catalítico para depositar modificaciones m6A en el ARN.
  Referencias relacionadas:
  PMID:27281194
  PMID:27373337
  PMID:27627798
• METTL3 deposita m6A en la secuencia consenso 5′-[AG]GAC-3′ del ARNm, regulando la estabilidad del transcripto, el procesamiento, la eficiencia de traducción y la edición.
  Referencias relacionadas:
  PMID:22575960
  PMID:24284625
  PMID:25719671
• La marca m6A promueve la desestabilización y degradación del ARNm una vez que los ARNm se liberan al nucleoplasma, lo que permite un control dinámico de la expresión génica.
  Referencias relacionadas:
  PMID:28637692
• En células madre embrionarias, la metilación m6A de transcriptos asociados a la pluripotencia por parte de METTL3 induce su degradación, facilitando así la salida del estado naive y la diferenciación.
• METTL3 contribuye a la regulación del reloj circadiano al acelerar el procesamiento nuclear de los ARNm de los genes del reloj y modular el metabolismo lipídico hepático.
  Referencias relacionadas:
  PMID:30428350
• Después del daño al ADN inducido por UV, METTL3 se recluta rápidamente en los sitios de daño donde cataliza la formación de m6A en transcritos de poli(A), promoviendo el reclutamiento de la ADN polimerasa κ (POLK).
  Referencias relacionadas:
  PMID:28297716
• En el citoplasma, METTL3 interactúa con factores de iniciación de la traducción para aumentar la traducción del ARNm independientemente de su actividad metiltransferasa; esta función está asociada a la proliferación de células cancerosas.
  Referencias relacionadas:
  PMID:27117702
• Durante la infección por SARS‑CoV‑2, METTL3 añade modificaciones m6A al ARN viral, reduciendo la unión a RIG‑I y atenuando así la detección inmune innata.
  Referencias relacionadas:
  PMID:33961823

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aminoácidos 1–156) de METTL3 humano. Al usar este anticuerpo, tenga en cuenta que puede reconocer epítopos dentro de este fragmento; valide la unión a METTL3 de longitud completa y posibles isoformas en su sistema de muestra.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es ~64 kDa. Optimice el porcentaje de gel (por ejemplo, SDS-PAGE al 10%) y las condiciones de transferencia para proteínas de tamaño medio. Utilice controles positivos y negativos adecuados.
• La idoneidad informada del anticuerpo para ChIP sugiere que puede inmunoprecipitar complejos de METTL3-ARN o cromatina; ajuste finamente el entrecruzamiento, la sonicación y la rigurosidad de los lavados para su protocolo específico.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC) e inmunohistoquímica (IHC-P), se deben optimizar las condiciones de fijación y permeabilización para preservar el epítopo y permitir el acceso del anticuerpo.
• Se enumeran múltiples aplicaciones; sin embargo, cada laboratorio debe establecer y optimizar el rendimiento del anticuerpo en sus propias condiciones experimentales.

CamelBio: Tu puente de abastecimiento integral

CamelBio es tu socio integral de abastecimiento de materias primas para IVD, que suministra parejas de anticuerpos validados, anticuerpos monoclonales/policlonales y reactivos auxiliares a granel para investigación en epitranscriptómica y cáncer. Desde el diseño inicial del ensayo hasta la validación clínica, apoyamos tu desarrollo de herramientas de diagnóstico fiables dirigidas a vías de modificación del ARN.