Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-METTL3 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q86U44

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de METTL3

• Identidad de la proteína: La subunidad catalítica N(6)-adenosina-metiltransferasa METTL3, también designada como proteína 3 similar a metiltransferasa (hMETTL3) o MT-A70, es el componente catalítico del complejo de ARN N6-metiltransferasa METTL3-METTL14.

• Función principal de N6-metiltransferasa: El heterodímero METTL3-METTL14 cataliza la formación de N6-metiladenosina (m6A) en el ARN, preferentemente en motivos de consenso 5'-[AG]GAC-3'. La modificación m6A regula la estabilidad, el procesamiento, la eficiencia de traducción y la edición del ARNm, influyendo en diversos procesos biológicos. Referencias relacionadas: PMID:22575960 | PMID:24284625 | PMID:25719671 | PMID:27281194 | PMID:27373337 | PMID:27627798

• Roles biológicos: La metilación m6A mediada por METTL3 participa en la regulación del reloj circadiano, la diferenciación de células madre embrionarias y hematopoyéticas, la neurogénesis cortical, la homeostasis de las células T, la espermatogénesis, la ovogénesis y la respuesta al daño en el ADN.

• Localización subcelular: Predominantemente nuclear con enriquecimiento en speckles nucleares; también se detecta en el citoplasma, lo cual es consistente con sus funciones en la modificación del ARN nuclear y la promoción de la traducción citoplasmática.

• Especificidad de tejido: Expresada ubicuamente a niveles bajos; se detecta particularmente en bazo, timo, próstata, testículo, ovario, intestino delgado, colon y leucocitos de sangre periférica.

• Modificaciones postraduccionales y palabras clave: Acetilada, fosforilada y sujeta a conjugación de ubiquitina. Posee dominios de unión a ARN y unión a S-adenosil-L-metionina, con un peso molecular de 64.474 Da.

• Relevancia en cáncer: Se observa sobreexpresión en varios tipos de cáncer, promoviendo la proliferación celular en parte a través de una mejora independiente de la metiltransferasa de la traducción del ARNm. Referencias relacionadas: PMID:27117702

• Sustratos adicionales: Metila miARN primarios (pri-miARN) para facilitar su reconocimiento y procesamiento por DGCR8, y modifica el ARN del SARS-CoV-2 para amortiguar la detección inmune innata dependiente de RIG-I. Referencias relacionadas: PMID:25799998 | PMID:33961823

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Diseño del inmunógeno: El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 1-156 de la terminal N del METTL3 humano, la cual está bien conservada entre humano, ratón y rata, lo que respalda sus afirmaciones de reactividad cruzada.
• Western blot (WB): Use lisados celulares totales o nucleares; se espera una banda cercana a 64 kDa. Valide el rendimiento del anticuerpo en su sistema de muestra específico, ya que las modificaciones postraduccionales o las variantes de isoformas pueden influir en la movilidad.
• Inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC): Puede ser necesaria la recuperación de antígeno para secciones de parafina. La tinción nuclear y de speckles nucleares debe predominar; también se pueden observar señales citoplasmáticas dependiendo del tipo celular y las condiciones de fijación.
• ELISA: El anticuerpo se puede utilizar como reactivo de detección contra METTL3 recombinante o antígenos peptídicos; se puede explorar el emparejamiento con un anticuerpo de captura METTL3 para el desarrollo de ELISA sándwich.
• Reactividad cruzada: Se informa que reconoce METTL3 humano, de ratón y de rata; se aconseja la verificación con controles positivos y negativos apropiados para cada especie.

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