Anticuerpo policlonal de conejo anti-METTL8 para WB, ELISA - Q9H825

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de METTL8

• METTL8 (proteína 8 similar a una metiltransferasa) también se conoce como metiltransferasa de N(3)-citidina del ARNt METTL8, mitocondrial, y metiltransferasa de N(3)-metilcitidina del ARNm METTL8. Pertenece a la superfamilia de las metiltransferasas y utiliza S-adenosil-L-metionina (SAM) como donante de metilo.
• Como enzima mitocondrial, METTL8 cataliza específicamente la modificación de N(3)-metilcitidina (m3C) en la posición 32 del bucle anticodón del ARNt(Ser)(UCN) y del ARNt(Thr) mitocondriales. Esta modificación es crucial para la eficiencia de la traducción mitocondrial y el funcionamiento adecuado de la cadena respiratoria. Referencias relacionadas: PMID:34774131, PMID:35017528
• La actividad de metilación de METTL8 sobre el ARNt(Ser)(UCN) mitocondrial requiere la modificación previa de N(6)-dimetilaliladenosina(37) (i6A37) por la enzima TRIT1, lo que indica una vía de modificación jerárquica. Referencias relacionadas: PMID:34774131, PMID:35017528
• Se ha informado que METTL8 media la modificación m3C en ciertos ARNm, pero la prevalencia y la importancia biológica de esta actividad in vivo siguen siendo inciertas y requieren una validación adicional. Referencias relacionadas: PMID:28655767, PMID:33313824
• A nivel subcelular, METTL8 se localiza predominantemente en las mitocondrias, en consonancia con su función en la modificación del ARNt mitocondrial. La proteína posee un péptido señal para su importación mitocondrial.
• El gen METTL8 experimenta corte y empalme alternativo, lo que potencialmente genera múltiples isoformas. UniProt incluye la isoforma revisada con un peso molecular aproximado de 33,4 kDa.
• Entre las características proteicas clave se incluyen la formación de enlaces isopeptídicos, la conjugación de Ubl y su clasificación dentro de las funciones de procesamiento del ARNt y las palabras clave mitocondriales.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para este anticuerpo es una proteína recombinante que abarca la región N-terminal (aminoácidos 1-140) de METTL8 humano. Esta región puede incluir partes del péptido señal y del dominio catalítico inicial.
• Para aplicaciones de Western blot (WB), considere utilizar lisados enriquecidos en mitocondrias o extractos celulares completos de muestras humanas, de ratón o de rata. El peso molecular previsto es de aproximadamente 33 kDa, pero las modificaciones postraduccionales o las variaciones de las isoformas pueden desplazar la banda.
• En ELISA, este anticuerpo policlonal puede detectar METTL8 nativo y desnaturalizado. Valide la especificidad de la señal utilizando controles adecuados, como líneas celulares con silenciamiento o eliminación de METTL8.
• Se ha indicado reactividad cruzada con METTL8 de ratón y de rata; sin embargo, debe comprobarse la homología de secuencia y determinarse empíricamente las condiciones óptimas de trabajo en su sistema experimental.
• Para estudios funcionales que relacionen METTL8 con la traducción mitocondrial o la actividad de la cadena respiratoria, considere utilizar este anticuerpo junto con ensayos de aislamiento y actividad mitocondrial.

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