Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-MGMT para WB, ELISA - P16455

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de MGMT

• El nombre oficial de la proteína es ADN-metilado--proteína-cisteína metiltransferasa, comúnmente conocida como O-6-metilguanina-ADN metiltransferasa (MGMT). También se denomina O-6-metilguanina-ADN-alquiltransferasa.
• MGMT es una enzima clave de reparación del ADN que proporciona defensa celular contra los efectos mutagénicos y citotóxicos de los agentes alquilantes. Elimina específicamente grupos metilo de la O6-metilguanina (O6-MeG) y la O4-metiltimina (O4-MeT) en el ADN.
• El mecanismo de reparación es una transferencia estequiométrica del grupo metilo desde la base nitrogenada dañada hasta un residuo de cisteína del sitio activo de la enzima. Esta es una reacción de suicidio, ya que la enzima se inactiva irreversiblemente después de una sola conversión.
• MGMT se localiza predominantemente en el núcleo, donde encuentra lesiones en el ADN genómico.
• La proteína une un ion de zinc por subunidad, y la coordinación del zinc es probablemente importante para su integridad estructural.
• MGMT está regulada por fosforilación, como lo indica su clasificación como una fosfoproteína.
• Las palabras clave asociadas con MGMT incluyen daño del ADN, reparación del ADN, metiltransferasa, transferasa, unión a metales y proteoma de referencia, destacando su papel establecido en el mantenimiento de la estabilidad genómica.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo monoclonal de conejo se generó contra un antígeno peptídico que abarca los aminoácidos 108–207 del MGMT humano. Se espera que detecte una banda a ~22 kDa en Western blot en condiciones reductoras.
• Para Western blot, considere incluir un control positivo como lisados de células humanas que se sabe que expresan MGMT (p. ej., HeLa, HEK293). Se debe ejecutar un control de carga en paralelo.
• Para aplicaciones de ELISA, el anticuerpo se puede utilizar como reactivo de captura o detección. Los formatos de ELISA indirecto o sándwich pueden optimizarse; asegúrese de que el antígeno de recubrimiento presente el epítopo adecuadamente.
• Dado que la expresión de MGMT puede variar entre los tejidos humanos y las líneas celulares, valide el anticuerpo en su sistema experimental para confirmar la reactividad y la especificidad.
• El anticuerpo está validado para reactividad humana; la reactividad cruzada con otras especies no se ha probado, por lo que no se puede garantizar el rendimiento en modelos no humanos.

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