Anticuerpo Monoclonal Anti-MLH1 (Validado por KO) para WB, ELISA - P40692

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Proteína de Reparación de Errores de Emparejamiento del ADN Mlh1

• MLH1 codifica la proteína de reparación de errores de emparejamiento del ADN Mlh1 (homólogo de la proteína MutL 1), un componente clave del sistema de reparación de errores de emparejamiento del ADN (MMR) post-replicativo. También se conoce por varios alias, incluyendo FCC2, COCA2 y HNPCC.
• MLH1 forma heterodímeros con PMS2 para constituir MutL alfa. Tras el reconocimiento de errores de emparejamiento por MutS alfa (MSH2-MSH6) o MutS beta (MSH2-MSH3), MutL alfa es reclutado al heterodúplex. En presencia de RFC y PCNA, activa la actividad endonucleasa de PMS2, introduciendo roturas de cadena sencilla cerca del error para facilitar la degradación específica de la cadena por EXO1.
• MLH1 también forma un heterodímero con MLH3 (MutL gamma) que participa en la recombinación meiótica.
• La proteína se localiza en el núcleo y se asocia con los cromosomas, lo cual es consistente con su función en la reparación del ADN y el mantenimiento de la integridad genómica.
• La expresión tisular es amplia, detectándose niveles más altos en colon, linfocitos, mama, pulmón, bazo, testículo, próstata, tiroides, vesícula biliar y corazón.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación y ubiquitinación. MLH1 participa en la señalización de daño del ADN, lo que puede inducir parada del ciclo celular o apoptosis tras un daño grave en el ADN. Se clasifica como un supresor de tumores, y las mutaciones en MLH1 están vinculadas al cáncer colorrectal hereditario no polipósico (HNPCC).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado es la proteína recombinante humana MLH1, que puede producir anticuerpos que reconozcan formas nativas y desnaturalizadas. En Western blot, se espera una banda específica alrededor de 85 kDa en lisados de células o tejidos humanos. Se recomienda incluir una muestra de control validada por knockout (KO) para confirmar la especificidad del anticuerpo.
• Para aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede utilizarse para la captura o detección del antígeno; considere emparejarlo con otro clon que objective un epítopo distinto para el desarrollo de ELISA sándwich. Utilice la proteína recombinante MLH1 como estándar para cuantificación.
• Dada la localización nuclear de MLH1, los protocolos de extracción nuclear apropiados pueden mejorar la sensibilidad de detección en WB cuando se utilizan lisados de células enteras.

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