Anticuerpo monoclonal anti-MLKL para WB, IHC-P y ELISA - Q8NB16

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de MLKL

• MLKL (proteína similar a un dominio de quinasa de linaje mixto) es una pseudoquinasa que desempeña un papel fundamental en la necroptosis inducida por el factor de necrosis tumoral (TNF), una vía de muerte celular programada distinta de la apoptosis. Referencias relacionadas: PMID:22265413, PMID:22265414, PMID:22421439
• Carece de actividad intrínseca de proteína quinasa y actúa aguas abajo de RIPK3. Tras la fosforilación por RIPK3, MLKL experimenta homotrimerización y se transloca a la membrana plasmática, induciendo la entrada de calcio y daños en la membrana para ejecutar la muerte celular necroptótica. Referencias relacionadas: PMID:22265413, PMID:22265414, PMID:22421439
• MLKL también media la necroptosis nuclear desencadenada por infecciones virales. Tras la activación por ZBP1, RIPK3 nuclear fosforila MLKL, lo que provoca la alteración de la envoltura nuclear y la filtración del ADN celular al citosol.
• La proteína se une a inositol fosforilados en gran medida, como el inositol hexakisfosfato (InsP6), que es esencial para su función necroptótica. Referencias relacionadas: PMID:29883610
• MLKL se localiza en el citoplasma, la membrana celular y el núcleo, en consonancia con su papel dinámico en la señalización y la ejecución de la muerte celular.
• El corte y empalme alternativo genera múltiples isoformas de MLKL, lo que potencialmente contribuye a la diversidad reguladora.
• Las palabras clave asociadas con MLKL incluyen unión a ATP, hélice superenrollada, necrosis, fosfoproteína y unión a nucleótidos, lo que refleja sus dominios estructurales y su papel en la señalización de la necroptosis.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo se produjo contra un péptido sintético de MLKL humano; puede reconocer formas desnaturalizadas y nativas, lo que permite aplicaciones como Western blot (WB) y ELISA.
• En Western blot, se espera una banda de aproximadamente 54 kDa tanto para MLKL humano como de ratón; incluya controles positivos adecuados para confirmar la especificidad.
• Para la inmunohistoquímica (IHC-P), puede ser necesario optimizar las condiciones de recuperación antigénica, y se recomienda la validación utilizando secciones de tejido positivo conocido.
• La reactividad cruzada del anticuerpo con MLKL de ratón permite su uso en modelos murinos de necroptosis; sin embargo, el rendimiento debe validarse en el sistema experimental correspondiente.
• Dado que MLKL es una fosfoproteína, considere el papel de la fosforilación en su contexto experimental, ya que las modificaciones inducidas por la activación pueden afectar a la detección.
• Para los ensayos de necroptosis, la inducción de la activación de MLKL suele requerir tratamientos combinados (por ejemplo, TNF-α, un mimético de Smac y un inhibidor de caspasas); confirme el estado de activación con controles adecuados.

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