Anticuerpo policlonal de conejo Anti-MLKL - Q8NB16

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de MLKL

• MLKL (proteína similar al dominio de quinasa de linaje mixta) es una pseudocinasa que desempeña un papel central en la necroptosis inducida por TNF, una vía de muerte celular programada.
  Referencias relacionadas: PMID:22265413, PMID:22265414, PMID:22421439
• Tras la fosforilación por RIPK3, MLKL forma homotrímeros, se transloca a la membrana plasmática y desencadena la muerte necrótica a través de la entrada de calcio y la ruptura de la membrana.
  Referencias relacionadas: PMID:22265413, PMID:22265414, PMID:22421439
• En el núcleo, MLKL puede mediar la necroptosis en respuesta a la infección por ortomixovirus, lo que conduce a la ruptura de la envoltura nuclear y la fuga de ADN al citosol.
• MLKL se une al hexafosfato de inositol (InsP6), que es esencial para su función necróptica.
  Referencias relacionadas: PMID:29883610
• Subcelularmente, la proteína se localiza en el citoplasma, la membrana plasmática y el núcleo.
• MLKL está sujeta a empalme alternativo y fosforilación; contiene regiones de bobina enrollada y de unión a nucleótidos, pero carece de actividad quinasa catalítica.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para la detección de MLKL endógeno por western blot, considere preparar lisados de células tratadas con inductores de necroptosis (por ejemplo, TNF + mimético de Smac + inhibidor de caspasas) y hibridar con el anticuerpo en diluciones que deben optimizarse.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, confirme la localización en membrana o citoplasma; puede requerirse permeabilización para la tinción intracelular.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), los métodos de recuperación de antígenos (por ejemplo, tampón de citrato mediado por calor) pueden mejorar la señal; valide la tinción en tejidos positivos conocidos.
• Se ha reportado reactividad cruzada con ratón y rata, pero el rendimiento debe verificarse en su matriz de muestra y protocolo específicos.
• El inmunógeno se dirige a la región C-terminal (aa 369-471); este anticuerpo puede reconocer múltiples isoformas, pero la especificidad de isoforma debe confirmarse experimentalmente.

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