Anticuerpo policlonal de conejo Anti-MLL5/KMT2E para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q8IZD2

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de MLL5/KMT2E

• MLL5, también conocido como lector de histonas KMT2E, es una histona-lisina N-metiltransferasa 2E inactiva que actúa como regulador asociado a la cromatina. Se une a la histona H3 trimetilada en Lys-4 (H3K4me3) a través de su dominio dedo PHD, mediando la interacción con la cromatina aguas abajo de los sitios de inicio de transcripción de los genes activos. Referencias relacionadas: PMID:23798402 PMID:24130829

• Desempeña un papel clave en la hematopoyesis, regulando la diferenciación mieloide terminal y la auto-renovación de las células madre hematopoyéticas a través de un mecanismo que involucra la metilación del ADN (Por similitud).

• MLL5 participa en la regulación del ciclo celular en múltiples etapas, incluyendo la transición G1/S, la progresión de la fase S y la entrada en mitosis. Es reclutado a promotores sensibles a E2F1 por HCFC1, donde estimula H3K4me3 y la activación transcripcional, facilitando la transición de G1 a fase S. Referencias relacionadas: PMID:14718661 PMID:18573682 PMID:19264965 PMID:23629655

• La isoforma NKp44L funciona como ligando celular del receptor de citotoxicidad natural NCR2/NKp44, actuando potencialmente como una señal de peligro en la inmunidad innata mediada por células NK.

• Subcelularmente, MLL5 se localiza en el núcleo (nucleoplasma y gránulos nucleares), pero también puede encontrarse en el citoplasma, el centrosoma y la membrana celular dependiendo de la isoforma y el contexto celular.

• La proteína se expresa ampliamente en tejidos adultos y fetales, con niveles más altos en el timo y riñón fetales, y en tejidos hematopoyéticos adultos, yeyuno y cerebelo. La isoforma NKp44L no se detecta en células circulantes sanas, pero se expresa en muchos tumores y líneas celulares transformadas. Referencias relacionadas: PMID:12101424 PMID:23958951

• Estructuralmente, MLL5 presenta un dominio SET (metiltransferasa inactiva), un dedo PHD y regiones de bobina enrollada, y está sujeto a modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación y ubiquitinación.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno cubre los aminoácidos 200-500, una región que contiene el dominio dedo PHD. Este anticuerpo puede ser particularmente adecuado para detectar MLL5 unido a cromatina en aplicaciones relacionadas con ChIP si se adapta correctamente.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de ~205 kDa; considere usar un gel de bajo porcentaje y tiempos de transferencia extendidos. Valide la especificidad con controles adecuados, ya que existen múltiples isoformas.
• En inmunofluorescencia e inmunohistoquímica, MLL5 puede presentar patrones de tinción de gránulos nucleares o centrosomales dependiendo del tipo de celular y la fijación. Incluya pasos de permeabilización y co-tinción con marcadores de organelos.
• Para ELISA, use el inmunógeno de proteína recombinante como antígeno de recubrimiento positivo para establecer las condiciones del ensayo. La reactividad cruzada con MLL5 de ratón y rata puede permitir pruebas multiespecie.

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