Anticuerpo policlonal de conejo anti-MMP1 para WB, ELISA - P03956

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de MMP1

• MMP1 (colagenasa intersticial o colagenasa de fibroblastos) es un miembro de la familia de las metaloproteinasas de la matriz que escinde los colágenos I, II y III en un único sitio de la hélice, así como los colágenos VII y X.
  Referencias relacionadas:
  PMID:1645757 PMID:2153297 PMID:2557822

• Durante la infección por VIH, MMP1 interactúa con la proteína Tat viral secretada y la escinde, reduciendo la neurotoxicidad mediada por Tat.
  Referencias relacionadas:
  PMID:16807369

• Se sintetiza como un zimógeno inactivo (pro-MMP1); la activación requiere la escisión autocatalítica del propéptido, regulada por el interruptor de cisteína y el motivo de unión al zinc.

• La enzima secretada se localiza en el espacio extracelular y la matriz extracelular, donde interviene en la degradación del colágeno y la remodelación tisular.

• Estructuralmente, MMP1 posee un péptido señal, un propéptido, un dominio catalítico con un sitio de unión al zinc y un dominio similar a la hemopexina; es una glucoproteína con enlaces disulfuro estabilizadores.

• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación y posiblemente la glucosilación, que pueden influir en la actividad enzimática y las interacciones extracelulares.

• El gen humano MMP1 codifica una proteína con un peso molecular calculado de aproximadamente 54 kDa, que actúa como una metaloproteasa dependiente de calcio.

• MMP1 participa en el recambio de la matriz extracelular, contribuyendo a procesos como la cicatrización de heridas, el desarrollo embrionario y la destrucción patológica de la matriz.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aa 20-280) abarca los dominios del propéptido y catalítico, por lo que potencialmente reconoce tanto las formas pro como las activas de MMP1, lo que lo hace adecuado para la detección de MMP1 total en WB.
• En condiciones reductoras de WB, la forma pro (~54 kDa) y la forma activa (~44 kDa) pueden resolverse; valide los tamaños de las bandas con controles adecuados.
• Para ELISA, considere combinar este anticuerpo con un anticuerpo monoclonal de captura dirigido a un epítopo distinto para mejorar la especificidad; evalúe la reactividad cruzada en la matriz de muestra pertinente.
• Se recomiendan como tipos de muestra los sobrenadantes de cultivos celulares o los homogeneizados tisulares; para la detección intracelular, un inhibidor de la secreción (p. ej., brefeldina A) puede mejorar la señal.
• Incluya controles positivos (p. ej., fibroblastos estimulados con PMA) y controles negativos para confirmar la inducción de MMP1 y la especificidad del anticuerpo.

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