Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-MMP12 para WB, IF/ICC, ELISA - P39900

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de MMP12

• La metaloelastasa de macrófagos (MMP-12, también conocida como ME, HME, MMP12) es una metaloproteinasa de matriz secretada que pertenece a la familia de endopeptidasas dependientes de zinc.
• MMP-12 exhibe una actividad elastolítica significativa y está involucrada en la lesión y remodelación tisular, con preferencia por la leucina en el sitio P1' y residuos aromáticos/hidrofóbicos en P1.
• La enzima se expresa principalmente en macrófagos alveolares y no se detecta en monocitos de sangre periférica, lo que destaca su papel en la homeostasis del tejido pulmonar y la inflamación.
• A nivel subcelular, MMP-12 se secreta al espacio extracelular y se localiza en la matriz extracelular, donde degrada la elastina y otros componentes de la matriz.
• Como miembro de la familia MMP, contiene dominios característicos, incluido un pro-péptido que mantiene la latencia (forma de zimógeno), y requiere iones de calcio y zinc para su actividad.
• Las características estructurales incluyen enlaces disulfuro y glicosilación, como indican las palabras clave de UniProt; se ha determinado una estructura 3D.
• La proteína de longitud completa tiene un peso molecular predicho de ~54 kDa (calculado 54002 Da), que corresponde a la banda observada en el Western blot.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno fue un péptido sintético correspondiente a los residuos 200-300 del MMP-12 humano (NP_002417.2). Al diseñar experimentos, considere que esta región se encuentra dentro del dominio catalítico y puede reconocer tanto las formas pro como activas, pero no se superpone con el péptido señal.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de aproximadamente 54 kDa; sin embargo, la glicosilación puede causar ligeros cambios en la migración. Valide el tamaño de la banda observada en su sistema de muestra específico.
• En IF/ICC, MMP-12 es secretada, por lo que las condiciones de permeabilización y fijación deben optimizarse para retener la señal asociada a la matriz extracelular. La tinción conjunta con marcadores de macrófagos puede ayudar a confirmar la especificidad en secciones de tejido.
• Para aplicaciones de ELISA, se recomiendan MMP-12 recombinante o estándares de proteína purificada para establecer curvas estándar y evaluar la eficiencia de unión del anticuerpo.

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