Anticuerpo Monoclonal Anti-CD3 de Ratón para Citometría de Flujo - P04235 / P22646

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del CD3

• La proteína objetivo, CD3δ (glucoproteína de superficie de células T cadena delta CD3), es un componente central del complejo TCR-CD3 presente en la superficie de los linfocitos T, donde desempeña un papel esencial en las respuestas inmunitarias adaptativas.
• Junto con CD3ε, CD3γ y CD247/CD3ζ, CD3δ transmite señales mediadas por TCR a través de la membrana celular tras el reconocimiento de antígenos por el receptor de células T (TCR), desencadenando vías de señalización descendentes.
• Todas las cadenas CD3 contienen motivos de activación basados en tirosina de inmunorreceptores (ITAM) en sus dominios citoplasmáticos. Tras la interacción del TCR, estos ITAM son fosforilados por las quinasas de la familia Src LCK y FYN, lo que provocan la activación de cascadas de señalización.
• CD3δ desempeña un papel crítico en la diferenciación de los timocitos al garantizar el correcto ensamblaje intracelular y la expresión en superficie del complejo TCR-CD3; sin un complejo funcional, los timocitos no logran diferenciarse correctamente. Referencias relacionadas: PMID:10935641
• CD3δ interactúa con los correceptores CD4 y CD8, estableciendo un enlace funcional entre el TCR y estas moléculas, lo cual es necesario para la activación y la selección positiva de las células T CD4+ o CD8+.
• La proteína CD3δ es una glucoproteína transmembrana con un péptido señal, una hélice transmembrana única y un dominio citoplasmático que contiene ITAM. Está sujeta a fosforilación y formación de enlaces disulfuro.
• CD3ε, el segundo objetivo reconocido por este anticuerpo, comparte similitudes estructurales y funcionales con CD3δ y también forma parte del complejo TCR-CD3, contribuyendo a la transducción de señales y el desarrollo de las células T.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético derivado del CD3 de ratón, lo que sugiere que el anticuerpo probablemente reconoce un epítopo lineal conservado entre las cadenas δ y ε, lo cual es consistente con su reactividad dual.
• Para la citometría de flujo (FC), considere titular el anticuerpo para determinar la concentración óptima para su población específica de linfocitos de ratón. Valide la tinción tanto en muestras de células T en reposo como activadas.
• Al tratarse de un anticuerpo monoclonal de rata, asegúrese de utilizar reactivos de detección secundarios anti-rata apropiados o estrategias de conjugación directa si se multiplexa con otros anticuerpos.
• Debido a los pesos moleculares predichos (19 kDa para CD3δ, 21 kDa para CD3ε), el anticuerpo también puede ser adecuado para la transferencia Western (Western blotting) en condiciones desnaturalizantes, aunque los datos del fabricante respaldan su uso en FC. Considere una validación interna si explora aplicaciones adicionales.

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