Anticuerpo Monoclonal Anti-CD45R/B220 de Ratón (Biotina) para Citometría de Flujo - P06800 / P08575

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CD45R/B220

• CD45R/B220, codificado por Ptprc, es una isoforma de la tirosína-proteína fosfatasa C de tipo receptor, también conocida como antígeno común de leucocitos (L-CA), antígeno linfocitario 5 (Ly-5) o T200. Es una glicoproteína transmembranal expresada principalmente en células hematopoyéticas.
• La proteína es un regulador clave de la activación de linfocitos T, actuando como molécula coestimuladora positiva al unirse a DPP4. Contiene dos dominios PTPasa intracelulares en tándem; el primero tiene actividad enzimática, mientras que el segundo modula la especificidad por el sustrato.
• Tras la activación del receptor de linfocitos T, CD45 recluta y desfosforila moléculas de señalización como SKAP1, FYN y LYN, ajustando con precisión el umbral de activación y previniendo la autorreactividad.
• CD45 interactúa con CLEC10A en células presentadoras de antígeno en la sinapsis inmunológica; esta interacción en células dendríticas inmaduras reconoce CD45 que porta el antígeno Tn en linfocitos T efectores, contribuyendo a la tolerancia periférica.
• La isoforma B220 se genera por empalme alternativo y se expresa predominantemente en linfocitos B y algunos linfocitos T activados, sirviendo como marcador pan-B clásico en ratones.
• A nivel subcelular, CD45 se localiza en la membrana celular, las balsas de membrana y la sinapsis inmunológica, donde su agrupación y exclusión de los microdominios de señalización influyen en su actividad.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen una extensa glicosilación unida a N y O, que afectan su conformación y las interacciones con ligandos.
• La proteína de ratón tiene un peso molecular predicho de ~144 kDa, pero la glicosilación y las variaciones de isoforma dan como resultado bandas observadas entre 130 kDa y 144 kDa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para citometría de flujo, realice una titulación del anticuerpo biotinilado para determinar la concentración óptima para su población celular específica. Incluya controles de isotipo adecuados y asegure el bloqueo de los receptores Fc cuando sea necesario.
• Dado que el anticuerpo está biotinilado, la detección requiere un reactivo secundario de estreptavidina o avidina conjugado con fluoróforo. Elija un conjugado de estreptavidina con mínima reactividad cruzada con la especie de su muestra.
• Valide la especificidad de la tinción en líneas celulares conocidas positivas y negativas para CD45R/B220 (por ejemplo, esplenocitos de ratón o líneas celulares B) para confirmar el rendimiento.
• Para paneles multicolores, verifique la superposición espectral y utilice controles de compensación de tinción simple.
• Alternativamente, el anticuerpo se puede utilizar en otras aplicaciones después de la validación, pero está optimizado principalmente para citometría de flujo.

CamelBio: Su Puente de Abastecimiento Integral

CamelBio actúa como socio de abastecimiento integral para materias primas de IVD, ofreciendo pares de anticuerpos validados, anticuerpos monoclonales y policlonales optimizados, reactivos auxiliares a granel y abastecimiento de materias primas para dianas poco comunes. Para investigadores que se centran en la biología de linfocitos y la señalización de linfocitos T, nuestra cartera incluye anticuerpos de alta calidad como este clon anti-CD45R/B220, que respalda el inmunofenotipado basado en citometría de flujo y el desarrollo de ensayos diagnósticos.