Anticuerpo monoclonal anti-IgM de ratón para WB, IHC-P, FC, ELISA - P01872

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la región constante pesada de IgM

• Identidad proteica e isoformas: El blanco es la cadena mu constante de inmunoglobulina pesada (cadena mu de Ig), codificada por el gen Ighm (alias Igh-6). Constituye la región constante de los anticuerpos IgM y existe en isoformas secretada (sIgM) y unida a membrana (mIgM) mediante splicing alternativo.
• Unión al antígeno y ensamblaje de dominios variables: En la inmunidad humoral, los dominios variables de una cadena pesada y una cadena ligera forman el sitio de unión al antígeno. Estos dominios se ensamblan mediante reordenamiento V-(D)-J y sufren hipermutación somática para la maduración de la afinidad tras la exposición al antígeno (Por similitud).
• Multimerización y polirreactividad de la IgM secretada: La sIgM forma multímeros de pentámeros o hexámeros para una unión al antígeno de alta avidez. La sIgM natural es polirreactiva y reconoce estructuras conservadas propias y derivadas de patógenos, mientras que la sIgM inmune es específica de antígeno; ambas son esenciales para una respuesta humoral eficaz. Referencias relacionadas: PMID:10899913 PMID:28135254 PMID:34788614
• Funciones efectoras por receptores Fc y complemento: Las funciones efectoras de la sIgM están mediadas por el receptor Fc de alta afinidad FCMR en células linfoides, que promueve las respuestas de IgG y la autotolerancia, y por el reclutamiento de C1q para activar la vía clásica del complemento, facilitando la neutralización de patógenos y la fagocitosis de células apoptóticas. Referencias relacionadas: PMID:10899913 PMID:11062505 PMID:28135254
• Inmunidad mucosa y transcitosis: En las superficies mucosas, la sIgM se transporta a través del epitelio por PIGR y se secreta con el componente secretor. Los complejos IgM-antígeno se pueden transcitosis de forma retrógrada a través de las células M hacia los tejidos linfoides mediante FCMR. Referencias relacionadas: PMID:34788614
• Señalización del BCR de IgM unido a membrana: Como parte del complejo del receptor de células B, la IgM unida a membrana proporciona la señalización tónica constitutiva necesaria para la supervivencia de las células B y media la señalización del pre-BCR que regula el reordenamiento de genes de inmunoglobulinas y la exclusión alélica.
• Localización subcelular y expresión tisular: La proteína se localiza en la membrana celular (como componente del BCR) y es secretada. Se expresa en la médula ósea y en células B-1 y B-2 a nivel proteico.
• Modificaciones postraduccionales y palabras clave estructurales: Se caracteriza por enlaces disulfuro, glicosilación N-ligada, dominios de inmunoglobulina y una hélice transmembrana (en la isoforma unida a membrana). Palabras clave: enlace disulfuro, glicoproteína, dominio de inmunoglobulina, membrana, secretado, transmembrana.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado es una proteína de fusión recombinante que abarca los aminoácidos 105-454 de Ighm de ratón (P01872), correspondiente a una región dentro del dominio constante. Este diseño puede dirigirse a epítopos conservados entre las isoformas secretada y unida a membrana, permitiendo potencialmente la detección de ambas formas.
• Para Western blotting (WB), el peso molecular previsto del blanco es de aproximadamente 50–53 kDa en condiciones reductoras. Se recomienda utilizar controles adecuados, como lisados de bazo de ratón o IgM purificada, y validar el patrón de bandas en su sistema de muestras.
• En inmunohistoquímica de tejidos embebidos en parafina (IHC-P), la recuperación óptima de antígeno y la dilución del anticuerpo deben determinarse experimentalmente. El anticuerpo está diseñado para su uso en tejidos de ratón; no se ha informado reactividad cruzada con otras especies.
• Para citometría de flujo (FC), asegure un bloqueo adecuado del receptor Fc y utilice reactivos de detección secundaria o conjugados directamente compatibles con el formato monoclonal de conejo. Se recomienda prevalidar la tinción en poblaciones de linfocitos B de ratón (por ejemplo, esplenocitos).
• En aplicaciones de ELISA, el anticuerpo se puede utilizar para captura o detección de IgM de ratón. Se recomienda aparearlo con un anticuerpo de detección adecuado para configuraciones de ELISA sándwich y validar la sensibilidad y especificidad del ensayo.

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