Anticuerpo policlonal anti-MSH2 para WB, IF/ICC, ELISA - P43246

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la proteína Msh2 de reparación de errores de apareamiento del ADN

• Componente central del sistema de reparación de errores de apareamiento del ADN (MMR) posterior a la replicación. Forma dos heterodímeros: MutS alfa (con MSH6) y MutS beta (con MSH3), que se unen al ADN mal apareado para iniciar la reparación.
• MutS alfa reconoce los errores de apareamiento de una sola base y los pequeños bucles de inserción-deleción (1–2 nucleótidos), mientras que MutS beta reconoce bucles más grandes de hasta 13 nucleótidos.
• Al unirse, los heterodímeros doblan el ADN, protegen aproximadamente 20 pares de bases y reclutan MutL alfa para coordinar la discriminación de la hebra, la escisión y la resíntesis.
• Recluta la helicasa de ADN MCM9 a la cromatina, facilitando el desenrollamiento de la hebra que contiene el error de apareamiento. Referencias relacionadas: PMID:26300262
• La unión y la hidrólisis de ATP actúan como un interruptor molecular: el ADN mal apareado desencadena el intercambio de ADP→ATP, convirtiendo MutS alfa en una abrazadera deslizante que difunde a lo largo del ADN y permite eventos posteriores de reparación.
• También desempeña un papel en la reparación del ADN mediante recombinación homóloga y, en los melanocitos, puede modular la regulación del ciclo celular y la apoptosis inducidas por UV-B.
• La localización subcelular es predominantemente nuclear y asociada a los cromosomas, en consonancia con su función de vigilancia genómica. Se expresa de forma ubicua en los tejidos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación y ubiquitinación. Actúa como supresor tumoral; las mutaciones están asociadas con el cáncer colorrectal hereditario no polipósico (HNPCC/síndrome de Lynch).

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 1–300 del extremo N-terminal de MSH2 humano. Como anticuerpo policlonal, reconoce múltiples epítopos dentro de esta región, lo que puede proporcionar una detección robusta, pero debe verificarse la consistencia entre lotes.
• El peso molecular esperado es de 105 kDa. Los controles positivos adecuados incluyen líneas celulares humanas de uso habitual (p. ej., HeLa, HEK293) y tejidos de ratón/rata, dada la expresión ubicua de MSH2.
• Para Western blot (WB), pueden emplearse protocolos estándar; considere optimizar el bloqueo y la dilución del anticuerpo para el tipo de muestra específico.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), se espera tinción nuclear. Utilice métodos adecuados de fijación y permeabilización para preservar los antígenos nucleares.
• La reactividad cruzada con ratón y rata permite realizar estudios traslacionales, pero se recomienda la validación en el sistema de muestras correspondiente.

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