Anticuerpo monoclonal anti-MSH6 para WB, IF/ICC, ELISA - P52701

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de MSH6

• MSH6 codifica la proteína de reparación de emparejamiento incorrecto de ADN Msh6, también conocida como GTBP, GTMBP, homólogo 6 de la proteína MutS y p160, un componente clave del sistema de reparación de emparejamiento incorrecto (MMR) post-replicativo.
• Forma un heterodímero con MSH2 para formar el complejo MutS alfa, que reconoce emparejamientos incorrectos de una sola base y pequeños bucles de inserción-deleción, iniciando la reparación del ADN.
• MutS alfa se une al ADN con emparejamiento incorrecto, dobla la hélice, protege aproximadamente 20 pares de bases y recluta MutL alfa para dirigir eventos de reparación posteriores, incluida la discriminación de hebras, escisión y resíntesis.
• La unión e hidrólisis de ATP por MSH6 actúan como un interruptor molecular: el ADN con emparejamiento incorrecto desencadena el intercambio ADP→ATP, induciendo un cambio conformacional que convierte a MutS alfa en una abrazadera deslizante para difusión a lo largo del ADN.
• El dominio PWWP de MSH6 se une específicamente a la lisina 36 trimetilada de la histona H3 (H3K36me3), mediando su reclutamiento a la cromatina en la fase G1 y S temprana para vincular la replicación del ADN con el reconocimiento de emparejamientos incorrectos.
• Localizado en el núcleo y en los cromosomas, MSH6 es crítico para mantener la estabilidad genómica; su disfunción está asociada con el síndrome de Lynch (cáncer colorrectal hereditario no polipósico) y otras neoplasias malignas.
• La proteína tiene un peso molecular de aproximadamente 153 kDa, consistente con su gran masa predicha de 152 786 Da, y sufre modificaciones postraduccionales que incluyen acetilación y fosforilación.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aminoácidos 1–100) de MSH6 humano, que contiene el dominio PWWP; considere que el epítopo puede estar enmascarado por interacciones con H3K36me3 en cromatina fijada.
• Para Western blot, se espera una banda alrededor de 153 kDa; debido al gran tamaño, utilice geles de SDS-PAGE de bajo porcentaje y tiempos de transferencia prolongados.
• En IF/ICC, espere tinción nuclear; la co-localización con marcadores de cromatina puede requerir optimización de la permeabilización.
• Confirme la reactividad cruzada con muestras de ratón y rata (validado en humano, ratón, rata), pero verifique la homología de secuencia en la región del inmunógeno para otras especies antes de su uso.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir el emparejamiento con un anticuerpo de detección adecuado; considere el recubrimiento directo del péptido sintético o MSH6 recombinante.

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