Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-MSH6 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P52701

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de MSH6

• La proteína de reparación de errores de emparejamiento del ADN Msh6, también conocida como proteína de unión a desajustes G/T (GTBP) o p160, es un componente del sistema de reparación de errores de emparejamiento del ADN (MMR) post-replicativo.
• Se heterodimeriza con MSH2 para formar el complejo MutS alfa, que reconoce desajustes de una sola base y bucles de inserción-deleción de dinucleótidos (IDL) en el ADN, doblando la hélice y protegiendo ~20 pares de bases al unirse.
• Tras el reconocimiento del desajuste, MutS alfa recluta a MutL alfa para formar un complejo ternario, desencadenando eventos de reparación posteriores que incluyen la discriminación de hebras, la escisión y la resíntesis.
• La unión e hidrólisis de ATP actúan como un interruptor molecular: el ADN desemparejado induce el intercambio ADP→ATP, convirtiendo a MutS alfa en una pinza deslizante que difunde a lo largo del ADN, un proceso esencial para la reparación de desajustes.
• Es reclutada a la cromatina en la fase G1 y al principio de la fase S a través de su dominio PWWP, que se une específicamente a la histona H3 trimetilada en la Lys36 (H3K36me3), permitiendo la marcación temprana de los orígenes de replicación.
• Se localiza en el núcleo y los cromosomas; las mutaciones en MSH6 están asociadas con el cáncer colorrectal hereditario no polipósico (HNPCC/síndrome de Lynch) y otras variantes de la enfermedad.
• Anotado con palabras clave: daño del ADN, reparación del ADN, unión al ADN, unión a ATP, unión a nucleótidos, interacción huésped-virus y splicing alternativo, reflejando sus diversos roles regulatorios.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Dado que el inmunógeno es un péptido sintético del extremo N-terminal, asegúrese de que el anticuerpo reconozca la proteína nativa validando en un sistema que exprese MSH6 de longitud completa, como lisados de células HeLa o MCF7 para WB.
• Para IHC-P, optimice la recuperación de antígenos (p. ej., tampón de citrato pH 6.0 o EDTA pH 9.0) y considere que MSH6 es nuclear; evalúe la tinción en tejido de adenocarcinoma colorrectal humano o amígdala como controles positivos.
• En IF/ICC, permeabilice las células adecuadamente para acceder a los antígenos nucleares y considere la tinción simultánea con un marcador nuclear para confirmar la localización.
• Para ELISA, puede requerirse un anticuerpo emparejado contra un epítopo que no se superponga; valide con proteína recombinante MSH6 o ensayos de competencia con péptidos.
• Debido a que MSH6 es una proteína grande (153 kDa), use porcentajes de gel apropiados (p. ej., SDS-PAGE al 6-8%) y tiempos de transferencia extendidos para WB.

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