Anticuerpo policlonal anti-MT-ATP6 para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P00846

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de MT-ATP6

• MT-ATP6 codifica la subunidad a del complejo F(0) de la ATP sintasa, también conocida como proteína 6 de la F-ATPasa, un componente central del complejo V de la cadena respiratoria mitocondrial.
• La subunidad a colabora con la subunidad c (ATP5MC1) para formar el canal de conducción de protones en el dominio F(0), impulsando la síntesis de ATP mediante el mecanismo catalítico rotatorio.
• La proteína se encuentra en la membrana interna mitocondrial y la atraviesa varias veces, creando dos semic anales para la translocación de protones mediante un mecanismo de Grotthuss.
  Referencias relacionadas: PMID:37244256
• Las mutaciones en MT-ATP6 están relacionadas con trastornos mitocondriales, incluida la neuropatía óptica hereditaria de Leber, el síndrome de Leigh, la neuropatía, la ataxia y la retinitis pigmentosa (como se indica en las palabras clave de enfermedades de UniProt).
• La proteína está altamente conservada entre humanos, ratones y ratas, lo que sugiere un potencial de reactividad cruzada.
• Con un peso molecular aproximado de 25 kDa (24.817 Da por cálculo), migra como una banda definida en SDS-PAGE bajo condiciones apropiadas.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno se dirige a la secuencia de los aminoácidos 1-100 del extremo N-terminal de MT-ATP6 humano, que se predice que está orientado hacia la matriz mitocondrial. Por lo tanto, la permeabilización de la membrana es esencial para permitir el acceso al epítopo en IF/ICC e IHC-P.
• Para la transferencia Western, se espera una banda cercana a 25 kDa. El enriquecimiento de las fracciones mitocondriales puede mejorar la relación señal/ruido.
• En la tinción inmunológica, se recomienda la colocalización con un marcador mitocondrial (por ejemplo, MitoTracker o anti-ATP5A) para confirmar la especificidad.
• Los métodos de recuperación antigénica (inducida por calor o enzimática) pueden ser necesarios para cortes fijados con formalina e incluidos en parafina en IHC-P; realice pruebas en tejidos con abundantes mitocondrias (corazón, músculo esquelético).
• Estas recomendaciones se basan en las propiedades del inmunógeno y en la biología de la diana; cada laboratorio debe establecer su propio protocolo optimizado.

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