Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Mieloperoxidasa (Mpo) para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P11247

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Mieloperoxidasa (Mpo)

• La mieloperoxidasa (Mpo) es una peroxidasa que contiene hemo y hierro, altamente expresada en los gránulos azurófilos de los neutrófilos, que funciona como un homodímero de cadenas pesadas y ligeras glicosiladas unidas por enlaces disulfuro.
• Como efector clave de la inmunidad innata, la Mpo cataliza la conversión de peróxido de hidrógeno e iones de cloruro en ácido hipocloroso (HOCl), un oxidante microbicida potente.
  Referencias relacionadas: PMID:11593004
• La Mpo es fundamental para la formación de trampas extracelulares de neutrófilos (NETs), un proceso en el que se transloca al núcleo, interrumpe los nucleosomas y promueve la descondensación de la cromatina para formar redes de ADN extracelular que atrapan patógenos.
  Referencias relacionadas: PMID:10085024, PMID:23306200
• La actividad microbicida directa de la Mpo se amplifica mediante su capacidad para oxidar varios sustratos, generando especies reactivas adicionales como ácido hipobromoso, radical dióxido de nitrógeno y radicales de tirosina proteica.
• La Mpo es una proteína de múltiples compartimentos: almacenada en gránulos azurófilos citoplasmáticos, translocada a fagosomas tras la infección y secretada activamente; durante la NETosis, se localiza en el núcleo y los cromosomas.
• La actividad de la enzima depende del calcio, y su forma madura se estabiliza mediante enlaces disulfuro intracadena, con modificaciones postraduccionales que incluyen la N-glicosilación, críticas para el plegamiento y la actividad adecuados.
• Además, la Mpo contribuye al daño tisular inflamatorio mediante la cloración y nitración de proteínas del huésped, como la apolipoproteína A-I, deteriorando así el eflujo de colesterol y promoviendo la aterosclerosis.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno, una proteína recombinante que abarca los aminoácidos 16–718 del Mpo de ratón, cubre casi toda la secuencia precursora (excluyendo el péptido señal), lo que sugiere que el anticuerpo puede reconocer tanto la proenzima como las cadenas pesadas/ligeras procesadas.
• Para la transferencia Western (Western blotting), el peso molecular predicho es de ~81 kDa para el precursor; en condiciones reductoras, también pueden detectarse las cadenas pesada (~60 kDa) y ligera (~15 kDa) dependiendo del procesamiento de la muestra y el tipo celular.
• Para inmunofluorescencia e inmunohistoquímica, considere optimizar los protocolos de permeabilización y recuperación de antígenos para detectar la Mpo en los gránulos azurófilos (citoplasmáticos), fagosomas, o durante la NETosis cuando se produce la localización nuclear.
• El anticuerpo está validado para ELISA; asegure condiciones de recubrimiento adecuadas e incluya pasos de bloqueo y lavado apropiados para minimizar el fondo.
• Se ha demostrado reactividad cruzada con la Mpo humana y de rata, pero la intensidad de la señal puede variar; valide la serie de diluciones en la especie y el contexto tisular relevantes.

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