Anticuerpo policlonal de conejo Anti-N4BP1 para WB, IF/ICC, ELISA - O75113

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de N4BP1

• N4BP1 (proteína 1 de unión a NEDD4) es un supresor potente de la producción de citocinas y un regulador negativo clave de la señalización inmune innata, que limita las respuestas inflamatorias a estímulos menores de TLR.
• Actúa como factor de restricción contra el VIH-1 al unirse a los ARNm virales y degradarlos mediante su actividad ribonucleasa intrínseca. Referencias relacionadas: PMID:31133753
• Tras la infección por patógenos más amenazantes, N4BP1 es cortada por CASP8 corriente abajo de TLR3 o TLR4, lo que provoca su inactivación y permite la producción completa de citocinas.
• Inhibe la E3 ubiquitina-proteína ligasa ITCH al competir por la unión al sustrato a través del segundo dominio WW de ITCH, perjudicando la ubiquitinación.
• Se localiza en el citoplasma, citosol, núcleo, nucleolo y cuerpos nucleares de PML, lo que indica una distribución celular multifuncional.
• Se detecta en una amplia gama de tejidos, entre ellos corazón, pulmón, cerebro, hígado, músculo esquelético, páncreas, riñón, bazo, testículo y ovario.
• Palabras clave de UniProt destacan sus funciones como hidrolasa, nucleasa, proteína de unión a ARN y fosfoproteína involucrada en la inmunidad innata.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 190–590 de la N4BP1 de ratón, una región que contiene el dominio NYN (ARnasica) y parte de la región de interacción con ITCH. Se espera que este diseño produzca un anticuerpo que reconozca la N4BP1 de longitud completa en condiciones desnaturalizantes y nativas.
• Para Western blot, considere un rango de dilución inicial de 1:500–1:2000 y valídelo con controles positivos relevantes (por ejemplo, lisados de células humanas o de ratón que se sabe que expresan N4BP1).
• En inmunofluorescencia/ICC, confirme la localización nuclear y citoplasmática con protocolos adecuados de fijación y permeabilización; la inclusión de marcadores de cuerpos PML puede ayudar en los estudios de colocalización.
• El anticuerpo está validado para ELISA, por lo que es potencialmente adecuado para la captura o detección en ensayos sándwich; optimice las condiciones de recubrimiento y detección para su formato de inmunoensayo específico.
• Se especifica la reactividad cruzada con N4BP1 humana y de ratón; sin embargo, verifique la especificidad en su sistema experimental, especialmente si trabaja con muestras de otras especies.

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