Anticuerpo policlonal de conejo anti-NBS1/NBN (validado mediante KO) para WB, IHC-P y ELISA - O60934

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la nibrina

• NBN es un componente del complejo MRN (MRE11-RAD50-NBN), que desempeña un papel central en la reparación de roturas de doble cadena (DSB), la recombinación del ADN, el mantenimiento de la integridad de los telómeros y la meiosis. Referencias relacionadas: PMID:10888888 PMID:15616588 PMID:18411307

• El complejo MRN media la resección de los extremos del ADN dañado para generar ADN monocatenario destinado a la recombinación homóloga; también recluta otros factores de reparación y activa las quinasas ATM y ATR tras el daño del ADN. Referencias relacionadas: PMID:19759395 PMID:28867292 PMID:9705271

• Dentro del complejo MRN, NBN actúa como adaptador de interacción proteína-proteína, reconociendo específicamente proteínas fosforiladas y promoviendo su reclutamiento a los sitios de daño del ADN, incluidos MRE11, RAD50, ATM, ATR y RBBP8/CtIP. Referencias relacionadas: PMID:12419185 PMID:15616588 PMID:18411307 PMID:18583988 PMID:15064416 PMID:15790808 PMID:19759395 PMID:27814491 PMID:27889449 PMID:30787182 PMID:31537797

• NBN participa en el mantenimiento de la longitud de los telómeros mediante su interacción con TERF2; su fosforilación por CDK2 promueve la reparación por unión de extremos no homólogos en los telómeros, mientras que la NBN no fosforilada favorece la unión de extremos mediada por microhomología. Referencias relacionadas: PMID:10888888 PMID:28216226

• NBN aumenta la fosforilación de AKT1, posiblemente mediante su asociación con el complejo mTORC2. Referencias relacionadas: PMID:23762398

• A nivel subcelular, NBN se localiza en el núcleo, los cromosomas, los cuerpos PML y los telómeros.

• NBN se expresa de forma ubicua, con niveles relativamente altos en los testículos. Referencias relacionadas: PMID:9590180

• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación y ubiquitinación (formación de enlaces isopeptídicos).

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región C-terminal (aminoácidos 520–754) de la NBN humana; considere su reconocimiento de las formas de longitud completa y posiblemente truncadas en sus ensayos.
• Para la transferencia Western, se espera una banda de aproximadamente 85 kDa; sin embargo, confirme el peso molecular en su sistema de muestras y considere las posibles modificaciones postraduccionales que pueden alterar la migración.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), valide la tinción en tejidos que expresen NBN, como los testículos; optimice la recuperación antigénica y la dilución del anticuerpo para su tipo específico de muestra.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con la NBN de ratón y de rata; verifique la reactividad específica de la especie y la especificidad de la señal en su sistema modelo.
• Para aplicaciones de ELISA, pruebe el anticuerpo con proteína NBN recombinante o con recubrimiento de péptidos, y establezca controles adecuados.

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