Anticuerpo monoclonal de conejo PolymAb® anti-NCAM (CD56) para WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P13591 / P1595

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de NCAM1

• NCAM1 (Molécula de adhesión celular neural 1), también conocida como CD56 y MSK39, es una glicoproteína de la superfamilia de las inmunoglobulinas que media la adhesión célula-célula a través de interacciones homofílicas y heterofílicas.
• Desempeña un papel crítico en el desarrollo del sistema nervioso, incluyendo la adhesión neurona-neurona, la fasciculación de neuritas y la promoción del crecimiento de neuritas.
• NCAM1 se expresa como múltiples isoformas mediante empalme alternativo, incluyendo variantes transmembrana y ancladas a glicosilfosfatidilinositol (GPI), con una masa molecular calculada de aproximadamente 94.6 kDa (proteína madura ~95–120 kDa debido a la glicosilación).
• Subcelularmente, NCAM1 se localiza predominantemente en la membrana celular como una proteína de membrana tipo I de paso único, pero también existen formas secretadas y ancladas a GPI.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación N-ligada, formación de enlaces disulfuro y fosforilación en residuos citoplasmáticos; la isoforma anclada a GPI está lipidadada.
• Se ha identificado a NCAM1 como un receptor para la entrada viral; actúa como receptor de la célula huésped para el virus de la rabia y el virus del Zika.
• Se utiliza ampliamente como marcador para células asesinas naturales (NK) y ciertos tumores neuroendocrinos en inmunohistoquímica diagnóstica.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno cubre los residuos 20–413 de CD56 humano/ratón, correspondientes a los dominios extracelulares tipo inmunoglobulina. Es probable que el anticuerpo reconozca epítopos expuestos en la superficie, lo que lo hace adecuado para IF/ICC en células vivas y citometría de flujo.
• Para Western blot, espere bandas alrededor de 95–120 kDa debido a la glicosilación; valide utilizando líneas celulares de control positivo apropiadas (por ejemplo, tejido cerebral, células NK).
• En IHC-P, puede ser necesario el recuperación antigénica (por ejemplo, con buffer de citrato, pH 6.0); pruebe tanto los patrones de tinción de membrana como citoplasmáticos dependiendo de la expresión de la isoforma.
• Se ha reportado reactividad cruzada con rata, pero es recomendable verificarla en su sistema de tejido o células específico.
• Para ELISA, el anticuerpo puede usarse como reactivo de captura o detección después de confirmar su especificidad con proteína NCAM recombinante.

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